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技術(shù)文章

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)用技巧小結(jié)

閱讀:220          發(fā)布時(shí)間:2022-11-7

   細(xì)胞培養(yǎng)是指將細(xì)胞從動(dòng)物或植物體內(nèi)取出,然后在適宜的人工環(huán)境中生長(zhǎng)的過(guò)程。細(xì)胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過(guò)酶或機(jī)械方法進(jìn)行解離,也可以來(lái)源于已建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。

一、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)用技巧:

1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。

2. 不管是買的細(xì)胞,還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測(cè)是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天*更換一次培養(yǎng)基。

3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢,可以買個(gè)支原體檢測(cè)的試劑盒定期檢測(cè)一下。

4. 不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同。有的生長(zhǎng)很快,比如說(shuō) MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索。

5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。

二、細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用:

細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞和分子生物學(xué)所使用的一項(xiàng)重要技術(shù),為細(xì)胞正常生理和生化研究 (如代謝研究、衰老研究)、藥物和毒性化合物對(duì)細(xì)胞的作用、以及致突變性和致癌性研究提供了上佳的模型系統(tǒng)。

細(xì)胞培養(yǎng)還可用于藥物篩選和開發(fā),以及生物化合物(如疫苗、治療性蛋白質(zhì))的大規(guī)模。在這些應(yīng)用中,使用細(xì)胞培養(yǎng)的一大優(yōu)勢(shì)在于,使用來(lái)源于同一克隆的一批細(xì)胞可獲得穩(wěn)定一致、可重復(fù)的結(jié)果。這也許是細(xì)胞培養(yǎng)的最主要應(yīng)用場(chǎng)景。

 

 



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