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豬ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中當(dāng)中應(yīng)注意兩個(gè)問(wèn)題
1.當(dāng)抗原材猜中的干擾物質(zhì)不易除掉,或不易得到滿(mǎn)足的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體.其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)賽與固相抗原結(jié)合.
2.標(biāo)本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,因而陽(yáng)性反響呈色淺于陰性反響.如抗原為高純度的,可直接包被固相.如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì),直接包被不易成功,可選用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,然后參加抗原,構(gòu)成固相抗原.
3.洗刷除掉抗原中的雜質(zhì),elisa試劑盒然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)賽結(jié)合反響.競(jìng)賽法測(cè)抗體有多種方法,可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)賽結(jié)合,抗HBcELISA一般選用此法.
4.另一種方法為將標(biāo)本與抗原一起參加到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)賽結(jié)合,洗刷后再參加酶標(biāo)抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反響.抗HBe的檢測(cè)一般選用此法.
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