化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
人上皮中性粒細胞活化肽78elisa試劑盒?操作步驟
閱讀：190 發(fā)布時間：2022-9-1人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa試劑盒操作步驟：
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘。
防御素β126(DEFβ126)重組蛋白
防御素β131(DEFβ131)重組蛋白
防御素β2(DEFβ2)重組蛋白
分泌跨膜蛋白1(SECTM1)重組蛋白
封閉蛋白9(CLDN9)重組蛋白
脯氨酸/絲氨酸豐富卷曲螺旋蛋白1(PSRC1)重組蛋白
脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白
輔肌動蛋白α2(ACTN2)重組蛋白
輔肌動蛋白α3(ACTN3)重組蛋白
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)重組蛋白
鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白
鈣結(jié)合蛋白(CR)重組蛋白
鈣聯(lián)蛋白(CNX)重組蛋白
鈣黏蛋白26(CDH26)重組蛋白
干擾素α(IFNα)重組蛋白
干擾素α2(IFNα2)重組蛋白
干擾素α4(IFNα4)重組蛋白
干擾素γ(IFNγ)重組蛋白
干擾素誘導內(nèi)質(zhì)網(wǎng)關(guān)聯(lián)病毒抑制蛋白(Viperin)重組蛋白
干細胞因子(SCF)重組蛋白
甘丙肽(GAL)重組蛋白
甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨酸蛋白酶2(MASP2)重組蛋白