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羊異檸檬酸脫氫酶試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗法）操作步驟
閱讀：202 發(fā)布時間：2020-5-7羊異檸檬酸脫氫酶（ICDH）試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗法）操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
實驗結果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。
試劑盒性能
1. 檢測范圍：12.5 U/L – 400 U/L。
2. 靈敏度：低檢測濃度小于1.0 U/L。
3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。