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尿酸（Uric Acid, UA）含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書
閱讀：618 發(fā)布時(shí)間：2020-4-29尿酸（Uric Acid, UA）含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書
可見分光光度法
注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
UA 是鳥類和爬行類動(dòng)物的主要代謝產(chǎn)物，正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素，含少量尿酸。此外，UA 還是重要的抗氧化劑，能清除超氧化物，羥自由基等。體內(nèi) UA 生成量和排泄量不平衡會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。例如，血中 UA 升高會(huì)引起痛風(fēng)、腎功能損害和動(dòng)脈硬化，相反 UA 降低會(huì)引起惡性貧血，在臨床診斷上具有重要的意義。
測(cè)定原理
尿酸酶能催化 UA 生成尿囊素，CO2 及H2O2 ，H2O2 氧化亞鐵化鉀中的Fe2+生成Fe3+，F(xiàn)e3+進(jìn)一步與酚和4-氨基安替比林縮合生成紅色醌類化合物，在505nm下有特征吸收峰，測(cè)定反應(yīng)體系505nm 的吸收值，可計(jì)算尿酸的含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制
緩沖液：液體 15mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：
A. 用于標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管，粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 10mL 緩沖液溶解。
B. 用于空白管，粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 5mL 緩沖液溶解。
試劑二：粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 10mL 雙蒸水水置于 60℃加熱溶解。
測(cè)定操作表
| 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | 測(cè)定管 |
試劑一（μL） | A, 200 | B, 200 | A, 200 |
H2O（μL） | 600 | 800 | 600 |
試劑二（μL） | 200 |
|
|
樣品（μL） |
|
| 200 |
混勻，37℃水浴 30min，于 1mL 玻璃比色皿，空白管調(diào)零，分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管 A505 。 | |||
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
UA 含量計(jì)算公式
尿酸（μmol/L）=A505測(cè)定管÷A505標(biāo)準(zhǔn)管×C 標(biāo)=A505測(cè)定管÷A505標(biāo)準(zhǔn)管×500
A505測(cè)定管：測(cè)定管吸光值；A505標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管吸光值；C標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)品濃度500μmol/L
注意事項(xiàng)
1. 血清樣本請(qǐng)?jiān)?4小時(shí)內(nèi)測(cè)定，或者4℃密封避光保存不超過(guò)72小時(shí)。
2. 吸光值大于0.8可用蒸餾水稀釋樣本，并在計(jì)算公式中算入稀釋倍數(shù)。
3. 低檢出限為10μmol/L。