SAM，也稱為 AdoMet，充當(dāng)修飾蛋白質(zhì)和 DNA 所需的甲基的供體。SAM 的異常水平與許多異常有關(guān)，包括阿爾茨海默氏癥、抑郁癥、帕金森氏癥、多發(fā)性硬化癥、肝功能衰竭和癌癥。

市面上，SAM甲基轉(zhuǎn)移酶酶活性分析試劑盒非常少，而且很多都是貼牌而來(lái)。如何選擇更加可靠的SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒？

艾美捷G-Biosciences SAM510系列——SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒，提供一種連續(xù)動(dòng)力學(xué)酶偶聯(lián)測(cè)定方法，可連續(xù)監(jiān)測(cè)純化的SAM依賴性甲基轉(zhuǎn)移酶，而無(wú)需使用放射性標(biāo)記或終點(diǎn)測(cè)量。 這是用于蛋白SAM甲基轉(zhuǎn)移酶的靈敏的酶偶聯(lián)試驗(yàn)。  

1.SAM510: SAM Methyltransferase AssaySAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒（比色法）【GBS-786-430】 100T 樣本：純化的SAM甲基轉(zhuǎn)移酶

2.SAM-fluoro: SAM Methyltransferase Assay SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒（熒光法）【GBS-786-431】100T 樣本：純化的SAM甲基轉(zhuǎn)移酶

說(shuō)明：

1.試劑盒需干冰運(yùn)輸，-80℃保存

2.可替代長(zhǎng)貨期產(chǎn)品：Sigma，CBA096

3.僅供科研使用，不得用于醫(yī)療.

艾美捷SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒原理：

從SAM中去除甲基會(huì)產(chǎn)生S-腺苷同型半胱氨酸，通過(guò)所含的腺苷同型型半胱氨酸核苷酶將其快速轉(zhuǎn)化為S-核糖同型半胱氨酸和腺嘌呤。這種快速轉(zhuǎn)化阻止了腺苷同型半胱氨酸的積累及其對(duì)甲基化反應(yīng)的反饋抑制。最后，腺嘌呤脫氨酶將腺嘌呤轉(zhuǎn)化為次黃-嘌-呤，然后轉(zhuǎn)化為尿酸鹽和過(guò)氧化氫。過(guò)氧化氫的產(chǎn)生速率通過(guò)510nm處吸光度的增加用比色法測(cè)定。由于腺苷高半胱氨酸核苷酶的特異性，該測(cè)定法可適用于任何純化的SAM依賴性甲基轉(zhuǎn)移酶或產(chǎn)生5-腺苷高半胱氨酸或5“-甲硫腺苷的純化酶。

艾美捷SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒特色：

1.純化甲基轉(zhuǎn)移酶的動(dòng)力學(xué)分析或篩選甲基化抑制劑。

2.用于動(dòng)力學(xué)研究的連續(xù)酶偶聯(lián)試驗(yàn)。

3.比色法，非放射性測(cè)定。

4.與所有試劑一起提供，包括陽(yáng)性對(duì)照。

5.適用于產(chǎn)生S-腺苷高半胱氨酸或5 '-甲硫腺苷的酶。

SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒-Nature文章鑒賞：

IF=69, 《MMSET regulates histone H4K20 methylation and 53BP1 accumulation at DNA damage sites》,Nature

體外組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定。

用血凝素（HA）標(biāo)記抗體從293T細(xì)胞中表達(dá)并純化了HA-MMSET和HA-53BP1。 重組組蛋白4蛋白來(lái)自Upstate。 根據(jù)制造商的說(shuō)明進(jìn)行體外組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定（SAM510：SAM甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定試劑盒，G-Biosciences）。 簡(jiǎn)而言之，所有蛋白質(zhì)都用0.1M Tris-HCl，pH 8.0透析。 20mM HA-MMSET（或HA-MMSET（S102A）突變體）和20mM H4（或HA-53BP1）用于每個(gè)反應(yīng)。 在37 ℃下每10 - 30秒測(cè)量510nm處的吸光度，直到增加的吸光度達(dá)到平臺(tái)或通過(guò)在SDS緩沖液中煮沸終止反應(yīng)，通過(guò)15% SDS-PAGE分離它們的內(nèi)容物，并通過(guò)用抗H4K20Me2抗體（Upstate）進(jìn)行免疫印跡來(lái)觀察H4的甲基化。