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一氧化氮熒光檢測試劑盒重組&計算方案

時間:2021/10/19閱讀:255
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影響生物水結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的因素 無機離子生命體系中大量存在的無機離子的靜電荷,使水分子圍繞其周圍徑向排列,形成有序的離子水化層。

 

一氧化氮(NO)在神經(jīng)傳遞、血管調(diào)節(jié)、免疫等方面起著重要作用反應(yīng)與細胞凋亡。由于NO迅速轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽(NO2-)以及硝酸鹽(NO3)-),亞硝酸鹽和硝酸鹽的總濃度用作NO的定量測量生產(chǎn)。

 

艾美捷 BioVision 一氧化氮熒光檢測試劑盒可提供準確、可靠的檢測結(jié)果在一個簡單的兩步過程中方便地測量總硝酸鹽/亞硝酸鹽濃度。

 

在步中,硝酸鹽通過硝酸還原酶轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽。第二步,亞硝酸鹽與熒光探針DAN(2,3-二氨基萘)反應(yīng)。NaOH提高了反應(yīng)速率熒光產(chǎn)率。熒光強度與總一氧化氮生成量成正比。使用培養(yǎng)基、血漿和組織勻漿對試劑盒進行了測試。

 

計算方法:

1.繪制標準曲線:繪制熒光與硝酸微微摩爾。

2.測定樣品硝酸鹽和亞硝酸鹽濃度:

 

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圖:在硝酸還原酶存在和不存在的情況下進行亞硝酸鹽、硝酸鹽測定。分析結(jié)果如下:根據(jù)試劑盒方案,在步驟5將硝酸鹽轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽1小時。

 

一氧化氮熒光檢測試劑盒重組:

1、分析緩沖液:分析緩沖液可隨時使用。在4°C下儲存。

2、酶輔因子:與110μl dH2O重組,制成10 mM儲備溶液。等分并在-20°C下儲存。冷凍/解凍時間應(yīng)限制為1次。適當稀釋部分10X,以制備1 mM工作溶液。使用時請保持在冰上。工作溶液可在4℃下儲存6-8小時。

3、增強子:用1.2毫升的分析緩沖液重組。在使用過程中保持冰上狀態(tài)。儲存在-20攝氏度。

4、硝酸還原酶:用1.2毫升分析緩沖液重新組合。等分所需數(shù)量并儲存在-20°C下。使用過程中請保持在冰上。冷凍/解凍時間應(yīng)限制為1次。

5、硝酸鹽/亞硝酸鹽標準品:用1.0 ml分析緩沖液重新配制,旋渦產(chǎn)生每個標準10毫米。不使用時,在4°C下保存(不要冷凍?。?。重組的標準品在4°C下儲存4個月后穩(wěn)定。

6、DAN探針和氫氧化鈉:隨時可用。在4°C下儲存。

 

 

相關(guān)研究工具:

1.一氧化氮比色分析試劑盒

2.谷胱甘肽熒光和比色檢測試劑盒

3.乳酸、丙酮酸、NADH/NAD、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麥芽糖分析試劑盒。


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