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Acti-stain 555鬼筆環(huán)肽的用途和研究方案一覽

時間:2021/7/12閱讀:416
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Phalloidin是蘑菇鵝膏菌中的一種七個氨基酸的肽毒素,它與肌動蛋白(F-actin)的聚合形式特異性結(jié)合并具有高親和力(kd20nm)。Phalloidin將肌動蛋白聚合的臨界濃度降低到1µg/ml以下,從而起到聚合促進(jìn)劑的作用。Phalloidin已經(jīng)用一種專有的紅色熒光染料標(biāo)記,它可以用來染色組織培養(yǎng)細(xì)胞和組織切片中的肌動蛋白絲(1,見圖1)?以及無細(xì)胞制劑?;钚匀旧?trade; 555yin莖環(huán)素標(biāo)記的肌動蛋白絲保留了未標(biāo)記肌動蛋白的許多功能特性,包括它們與肌球蛋白相互作用的能力。肌動蛋白染色™ 555 phalloidin以紅色固體形式提供。

 

3T3細(xì)胞Rho活化,細(xì)胞核用Dapi(藍(lán)色)染色,F-肌動蛋白用Acti染色™ 555(紅色F-肌動蛋白,Cat.#PHDH1-A)。

 

1.png

 

Acti染色的吸光度和熒光掃描™ 將標(biāo)記的鬼筆苷稀釋到甲醇中,分別在300-750560-750nm之間掃描其吸光度和激發(fā)光譜。吸收峰在560nm處,熒光峰在575nm處。

2.png

Acti-stain 555鬼筆環(huán)肽用途:

 

1.固定組織切片和組織培養(yǎng)細(xì)胞制備中肌動蛋白絲的熒光染色。注:與許多肌動蛋白抗體不同,Acti染色™ 555 phalloidin僅與F-肌動蛋白結(jié)合,導(dǎo)致低背景熒光。此外,肌動蛋白染色并沒有明顯的不同物種。

2.穩(wěn)定熒光肌動蛋白絲的體外制備。

 

肌動蛋白染色對確定活細(xì)胞和固定細(xì)胞骨架的結(jié)構(gòu)和功能非常有用。肌動蛋白細(xì)胞骨架在活細(xì)胞中是一個非常動態(tài)和不穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),但它可以在探測或染色肌動蛋白結(jié)構(gòu)之前用多聚甲醛固定。

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