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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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TUNEL法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒解決方案

時(shí)間:2020/12/23閱讀:356
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細(xì)胞凋亡的過(guò)程是細(xì)胞死亡中的研究熱門(mén)課題,接下來(lái)本文會(huì)講一下細(xì)胞死亡的原因及方式,以及相關(guān)的一些研究工具,希望對(duì)大家有所幫助!

 

一、細(xì)胞死亡的原因及方式

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細(xì)胞死亡是生命現(xiàn)象不可逆停止及生命的結(jié)束,正常的組織中經(jīng)常發(fā)生細(xì)胞死亡,是維持組織機(jī)能和形態(tài)所必須的,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡原因及方式主要有以下幾種:

 

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二、細(xì)胞凋亡的過(guò)程

 

細(xì)胞凋亡是1973年Kerr和Wyllin 先提出這一概念。細(xì)胞凋亡的過(guò)程大致可分為以下幾個(gè)階段:接受凋亡信號(hào)→凋亡調(diào)控分子間的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→進(jìn)入連續(xù)反應(yīng)過(guò)程。

 

細(xì)胞處于不同的凋亡階段具有不同的生物學(xué)特征,典型的特征包括:1)細(xì)胞膜PS(磷脂酰絲氨酸)外翻;2)線粒體膜電位喪失;3)細(xì)胞核濃縮和斷裂。此外在各個(gè)不同的時(shí)期:

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三、如何檢測(cè)晚期時(shí)的細(xì)胞特征?

 

細(xì)胞凋亡是個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,針對(duì)凋亡時(shí)期不同,檢測(cè)的方法有所不同,如何檢測(cè)晚期時(shí)的細(xì)胞特征?

 

細(xì)胞凋亡晚期,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè),這類(lèi)方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒(méi)有DNA的斷裂,因而沒(méi)有3'-OH形成,很少能夠被染色。TUNEL實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,在細(xì)胞凋亡的研究中被廣泛采用。

 

四、細(xì)胞凋亡晚期檢測(cè)工具

 

Abbkine的TUNEL法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒【TUNEL凋亡檢測(cè)試劑盒 (綠色熒光),KTA2010;TUNEL凋亡檢測(cè)試劑盒 (橙色熒光),KTA2011】提供實(shí)驗(yàn)所需的全套試劑組分以及優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)方案,適用于熒光酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀。適用于樣品類(lèi)型:貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞,石蠟包埋組織切片,冰凍切片。

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