MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 產(chǎn)品技術(shù)

時間：2025-7-5閱讀：64

在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究與生物技術(shù)應(yīng)用中，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）作為一項(xiàng)基礎(chǔ)且關(guān)鍵的技術(shù)，廣泛用于擴(kuò)增特定 DNA 片段。然而，PCR 反應(yīng)后產(chǎn)物的純化對于獲取高質(zhì)量、可用于下游實(shí)驗(yàn)的 DNA 樣本至關(guān)重要。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 是一款基于先進(jìn)的順磁性磁珠技術(shù)開發(fā)的 PCR 產(chǎn)物及下一代文庫制備的清潔系統(tǒng)，為科研工作者和生物技術(shù)企業(yè)提供了高效、可靠的 DNA 純化解決方案，在基因組學(xué)研究、臨床診斷、生物制藥等眾多領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。

一、產(chǎn)品技術(shù)原理

MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 的核心技術(shù)是基于順磁性磁珠對 DNA 分子的特異性結(jié)合與分離。該產(chǎn)品體系中的磁珠表面經(jīng)過特殊化學(xué)修飾，帶有能夠與 DNA 分子發(fā)生相互作用的功能基團(tuán)。在 PCR 反應(yīng)結(jié)束后的混合體系中，加入 MAGBIO HighPrep PCR 試劑，磁珠隨即分散在溶液中。此時，通過調(diào)整反應(yīng)體系的鹽離子濃度、pH 值等條件，使得 DNA 分子能夠選擇性地與磁珠表面的功能基團(tuán)結(jié)合。這種結(jié)合主要基于靜電相互作用、氫鍵以及范德華力等多種分子間作用力。例如，在適當(dāng)?shù)柠}離子濃度下，帶負(fù)電荷的 DNA 磷酸骨架與磁珠表面帶正電的功能基團(tuán)通過靜電引力相互吸引，從而實(shí)現(xiàn) DNA 在磁珠表面的吸附。

而 PCR 反應(yīng)體系中的其他成分，如未反應(yīng)的 dNTPs、引物、引物二聚體以及鹽類等雜質(zhì)，由于其分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)與 DNA 不同，無法與磁珠發(fā)生有效結(jié)合，仍留在溶液中。當(dāng)將反應(yīng)容器置于外部磁場中時，結(jié)合了 DNA 的磁珠會在外加磁場的作用下迅速聚集到容器的一側(cè)，而含有雜質(zhì)的上清液則可通過移液器等工具輕松移除，實(shí)現(xiàn)了 DNA 與雜質(zhì)的初步分離。隨后，通過適當(dāng)?shù)南礈觳襟E，使用特定的洗滌緩沖液進(jìn)一步去除磁珠表面殘留的雜質(zhì)，確保 DNA 的純度。最后，將磁珠從磁場中移出，加入低離子強(qiáng)度的洗脫緩沖液或去離子水，改變?nèi)芤旱碾x子環(huán)境，破壞 DNA 與磁珠之間的相互作用，使純化后的高純度 DNA 從磁珠表面洗脫下來，從而獲得可直接用于下游實(shí)驗(yàn)的 DNA 樣本。

二、產(chǎn)品組成與特性

（一）產(chǎn)品組成

MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 主要由順磁性磁珠懸浮液、配套的結(jié)合緩沖液、洗滌緩沖液以及洗脫緩沖液組成。磁珠懸浮液是核心成分，其中的磁珠具有超順磁性，即在外部磁場存在時表現(xiàn)出磁性，能夠迅速響應(yīng)磁場發(fā)生聚集；而在外部磁場移除后，磁珠又能快速恢復(fù)到均勻分散狀態(tài)，便于與 DNA 充分接觸和結(jié)合。結(jié)合緩沖液用于調(diào)整 PCR 反應(yīng)后混合液的離子強(qiáng)度和 pH 值，創(chuàng)造有利于 DNA 與磁珠結(jié)合的環(huán)境。洗滌緩沖液則用于在 DNA 與磁珠結(jié)合后，去除磁珠表面吸附的雜質(zhì)，確保 DNA 的純度。洗脫緩沖液為低離子強(qiáng)度溶液，用于將純化后的 DNA 從磁珠表面洗脫下來。

（二）產(chǎn)品特性

高效的 DNA 純化能力：該產(chǎn)品能夠高效去除 PCR 反應(yīng)體系中的各種雜質(zhì)，包括未摻入的 dNTPs、引物、引物二聚體以及鹽類等。通過優(yōu)化的磁珠結(jié)合與洗脫條件，可實(shí)現(xiàn)對 DNA 片段的高效捕獲和純化，使最終獲得的 DNA 樣本純度高，A260/A280 比值通常在 1.8 - 2.0 之間，滿足絕大多數(shù)下游實(shí)驗(yàn)對 DNA 純度的嚴(yán)格要求。

高回收率：對于長度大于 100bp 的 PCR 擴(kuò)增子，MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 具有出色的回收率。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，回收率可穩(wěn)定保持在較高水平，確保珍貴的 DNA 樣本不被浪費(fèi)，為低起始量樣本的后續(xù)研究提供了有力保障。

靈活的操作方式：該產(chǎn)品既適用于手動操作，方便科研人員在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中進(jìn)行小批量樣本的處理；又可適配多種自動化液體處理工作站，如 Beckman、Hamilton、Tecan、Caliper、Perkin Elmer、Agilent 和 Eppendorf 等品牌的設(shè)備。用戶可根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備條件和樣本通量需求，選擇合適的操作方式。通過與自動化設(shè)備結(jié)合，能夠?qū)崿F(xiàn)高通量的 PCR 產(chǎn)物純化，大大提高實(shí)驗(yàn)效率，滿足大規(guī)模基因組學(xué)研究、臨床診斷樣本批量處理等應(yīng)用場景的需求。

穩(wěn)定的性能表現(xiàn)：產(chǎn)品中的磁珠性能穩(wěn)定，在不同批次之間具有良好的一致性。無論是在手動操作還是自動化平臺上使用，都能保證穩(wěn)定的 DNA 純化效果和可靠的片段大小選擇能力。這使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有高度的可重復(fù)性，為科研工作的準(zhǔn)確性和可靠性提供了堅實(shí)基礎(chǔ)。

無需離心和過濾：傳統(tǒng)的 DNA 純化方法常依賴離心或過濾等操作步驟，這些過程不僅耗時費(fèi)力，還可能導(dǎo)致 DNA 樣本的損失或交叉污染。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 采用磁珠分離技術(shù)，避免了離心和過濾步驟，簡化了實(shí)驗(yàn)流程，減少了實(shí)驗(yàn)操作過程中引入誤差的可能性，同時也降低了樣本間交叉污染的風(fēng)險，有助于獲得更高質(zhì)量的 DNA 純化產(chǎn)物。

三、實(shí)驗(yàn)操作流程

（一）手動操作流程

準(zhǔn)備工作：在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，確保所有實(shí)驗(yàn)器材清潔無污染，準(zhǔn)備好 PCR 反應(yīng)后的產(chǎn)物、MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 試劑（包括磁珠懸浮液、結(jié)合緩沖液、洗滌緩沖液和洗脫緩沖液）、移液器及配套吸頭、磁力架、離心管等。將磁珠懸浮液充分混勻，使其處于均勻分散狀態(tài)。

結(jié)合步驟：取適量 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至離心管中，按照產(chǎn)品說明書的比例加入結(jié)合緩沖液，充分混勻。隨后加入適量的磁珠懸浮液，再次充分混勻，確保磁珠與 DNA 能夠充分接觸結(jié)合。將離心管置于室溫下孵育一定時間（通常為 5 - 10 分鐘），使 DNA 與磁珠之間的結(jié)合反應(yīng)達(dá)到平衡。

分離與洗滌：將離心管放置在磁力架上，靜置 1 - 2 分鐘，待磁珠在外加磁場作用下聚集到離心管一側(cè)后，小心吸取并移除上清液，注意避免吸頭觸及磁珠沉淀。向離心管中加入適量洗滌緩沖液，輕輕晃動離心管或用移液器吹打，使磁珠重新懸浮，以洗滌磁珠表面殘留的雜質(zhì)。再次將離心管置于磁力架上，靜置 1 - 2 分鐘，移除上清液。重復(fù)洗滌步驟 1 - 2 次，確保磁珠表面的雜質(zhì)被清除。

洗脫：將離心管從磁力架上取出，加入適量低離子強(qiáng)度的洗脫緩沖液或去離子水，輕輕吹打使磁珠重新懸浮，將離心管置于室溫下孵育 2 - 5 分鐘，使 DNA 從磁珠表面充分洗脫下來。然后將離心管再次放置在磁力架上，靜置 1 - 2 分鐘，待磁珠聚集后，將含有純化 DNA 的上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，即為純化后的 PCR 產(chǎn)物，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

（二）自動化操作流程

設(shè)備設(shè)置與試劑準(zhǔn)備：根據(jù)所使用的自動化液體處理工作站型號，按照其操作手冊進(jìn)行設(shè)備初始化和參數(shù)設(shè)置。將 MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 試劑分別裝載到工作站的相應(yīng)試劑槽中，確保試劑管路連接正確且無氣泡。準(zhǔn)備好 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物板和用于收集純化后 DNA 的微孔板。

方法編輯：在自動化工作站的控制軟件中，根據(jù) MAGBIO HighPrep PCR 的操作原理和產(chǎn)品說明書，編輯詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法。包括設(shè)置各試劑的添加體積、混合方式與時間、孵育時間、磁力分離時間以及洗脫步驟等參數(shù)。確保方法設(shè)置符合實(shí)驗(yàn)需求和設(shè)備性能。

運(yùn)行實(shí)驗(yàn)：將 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物板放置在工作站的指定位置，啟動自動化程序。工作站將按照預(yù)設(shè)方法依次完成 PCR 產(chǎn)物與結(jié)合緩沖液、磁珠懸浮液的混合，孵育促進(jìn) DNA 與磁珠結(jié)合，在磁力架上進(jìn)行磁珠分離與上清移除，洗滌磁珠以及最后洗脫 DNA 等一系列操作步驟。實(shí)驗(yàn)完成后，工作站將自動收集含有純化 DNA 的微孔板，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)分析。

（三）操作注意事項(xiàng)

在使用磁珠懸浮液前，務(wù)必充分混勻，以保證每次取用的磁珠量準(zhǔn)確且均勻。但需注意避免劇烈振蕩，防止磁珠團(tuán)聚或損壞。

移液器操作要準(zhǔn)確、規(guī)范，確保各試劑添加量的準(zhǔn)確性，尤其是磁珠懸浮液的加入量，會直接影響 DNA 的結(jié)合與純化效果。

在手動操作的洗滌步驟中，吸取上清液時要小心謹(jǐn)慎，避免吸走磁珠沉淀，導(dǎo)致 DNA 損失。在自動化操作中，要定期檢查移液器吸頭的安裝情況，防止吸頭脫落或堵塞影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

不同來源的 PCR 產(chǎn)物可能在濃度、片段大小分布等方面存在差異，在進(jìn)行大規(guī)模實(shí)驗(yàn)前，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化磁珠用量、結(jié)合與洗脫條件等參數(shù)，以獲得最佳的純化效果。

產(chǎn)品中的各種緩沖液應(yīng)在規(guī)定的儲存條件下保存，避免污染和變質(zhì)。一旦發(fā)現(xiàn)緩沖液出現(xiàn)渾濁、沉淀或顏色變化等異常情況，應(yīng)停止使用。

四、應(yīng)用場景

（一）基因組學(xué)研究

下一代測序（NGS）文庫制備：在 NGS 技術(shù)中，高質(zhì)量的 DNA 文庫是獲得準(zhǔn)確測序結(jié)果的前提。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 可用于 PCR 擴(kuò)增后的文庫片段純化，有效去除文庫制備過程中產(chǎn)生的引物二聚體、未反應(yīng)的 dNTPs 等雜質(zhì)，確保文庫中 DNA 片段的純度和完整性。通過精確的片段大小選擇能力，能夠篩選出符合測序要求的 DNA 片段，提高文庫質(zhì)量，為全基因組測序、外顯子組測序、轉(zhuǎn)錄組測序等各類 NGS 應(yīng)用提供高質(zhì)量的 DNA 樣本。

Sanger 測序：在傳統(tǒng)的 Sanger 測序?qū)嶒?yàn)中，PCR 產(chǎn)物的純化是關(guān)鍵步驟之一。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 能夠高效去除 PCR 反應(yīng)體系中的雜質(zhì)，獲得高純度的 DNA 模板，可顯著提高 Sanger 測序的準(zhǔn)確性和成功率。尤其在對未知基因片段進(jìn)行測序或需要對測序結(jié)果進(jìn)行精確分析時，該產(chǎn)品能夠有效減少測序峰圖中的雜峰干擾，使測序結(jié)果更加清晰可靠。

（二）臨床診斷

基因突變檢測與基因分型：在臨床分子診斷領(lǐng)域，基因突變檢測和基因分型對于疾病的早期診斷、個性化治療方案制定以及遺傳疾病的篩查具有重要意義。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 可用于從患者樣本（如血液、組織、唾液等）中提取的 DNA 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增后的產(chǎn)物純化。通過去除雜質(zhì)，提高 DNA 樣本的純度，能夠更準(zhǔn)確地檢測出基因突變位點(diǎn)，為疾病的診斷和治療提供可靠依據(jù)。例如，在腫瘤基因檢測中，該產(chǎn)品可幫助檢測腫瘤相關(guān)基因的突變情況，指導(dǎo)臨床醫(yī)生選擇合適的靶向治療藥物。

病原體檢測：對于病原體（如病毒、細(xì)菌、真菌等）的 PCR 檢測，MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 能夠有效純化 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物，提高檢測的靈敏度和特異性。在臨床樣本中，病原體的含量往往較低，且可能存在多種雜質(zhì)干擾 PCR 反應(yīng)和檢測結(jié)果。使用該產(chǎn)品進(jìn)行 PCR 產(chǎn)物純化，可去除樣本中的雜質(zhì)，富集病原體的 DNA 片段，從而更準(zhǔn)確地檢測出病原體的存在及其種類，為感染性疾病的診斷和治療提供有力支持。

（三）生物制藥

重組蛋白表達(dá)與純化過程中的質(zhì)量控制：在生物制藥過程中，利用基因工程技術(shù)表達(dá)重組蛋白是常見的生產(chǎn)方式。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 可用于對重組蛋白表達(dá)載體的構(gòu)建過程進(jìn)行監(jiān)控，通過對 PCR 擴(kuò)增的目的基因片段進(jìn)行純化，確保載體構(gòu)建的準(zhǔn)確性和純度。在重組蛋白表達(dá)后的純化過程中，該產(chǎn)品也可用于檢測和去除可能存在的宿主 DNA 殘留，保證重組蛋白產(chǎn)品的質(zhì)量安全，符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）的要求。

疫苗研發(fā)與生產(chǎn)：在疫苗研發(fā)和生產(chǎn)過程中，對核酸疫苗或病毒載體疫苗的制備需要高質(zhì)量的 DNA 或 RNA 模板。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 可用于純化 PCR 擴(kuò)增的相關(guān)核酸片段，為疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)提供純凈的核酸原料，確保疫苗的有效性和安全性。同時，在疫苗生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制環(huán)節(jié)，該產(chǎn)品可用于檢測和分析疫苗中可能存在的核酸雜質(zhì)，保障疫苗產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性。

MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 憑借其基于磁珠技術(shù)的創(chuàng)新設(shè)計、高效的 DNA 純化能力、靈活的操作方式以及廣泛的應(yīng)用場景，為分子生物學(xué)研究和生物技術(shù)應(yīng)用提供了有力的技術(shù)支持。在不斷發(fā)展的生命科學(xué)領(lǐng)域，合理使用該產(chǎn)品將有助于科研人員和生物技術(shù)從業(yè)者更高效、準(zhǔn)確地開展實(shí)驗(yàn)研究和生產(chǎn)工作，推動相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)進(jìn)步和發(fā)展。

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