特性：本身無(wú)熒光，進(jìn)入活細(xì)胞后，被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成有綠色熒光的 Calcein，可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，激發(fā)波長(zhǎng)為 495nm，發(fā)射波長(zhǎng)為 515nm。

優(yōu)點(diǎn)：細(xì)胞毒性低，能快速進(jìn)入細(xì)胞，染色效果穩(wěn)定，可用于長(zhǎng)時(shí)間觀察細(xì)胞。

應(yīng)用：常用于細(xì)胞活性檢測(cè)、細(xì)胞追蹤以及細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化的研究等。

特性：一種核酸染料，不能透過活細(xì)胞的細(xì)胞膜，但可進(jìn)入死細(xì)胞，與雙鏈 DNA 結(jié)合后，在 488nm 激光激發(fā)下發(fā)出紅色熒光，發(fā)射波長(zhǎng)為 617nm。

優(yōu)點(diǎn)：與 DNA 結(jié)合特異性高，熒光強(qiáng)度高，可用于區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

應(yīng)用：常用于細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期分析以及死活細(xì)胞鑒別等實(shí)驗(yàn)。常與其他活細(xì)胞熒光染料如 Calcein - AM 等聯(lián)合使用，通過不同顏色熒光區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

特性：可穿透細(xì)胞膜，與 DNA 特異性結(jié)合，在紫外光激發(fā)下發(fā)出藍(lán)色熒光。其中，Hoechst 33342 染色效果較好且細(xì)胞毒性相對(duì)較低，激發(fā)波長(zhǎng)為 350nm，發(fā)射波長(zhǎng)為 461nm。

優(yōu)點(diǎn)：能對(duì)活細(xì)胞和固定細(xì)胞進(jìn)行染色，可用于觀察細(xì)胞核形態(tài)和細(xì)胞周期分布。

應(yīng)用：常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)、染色體分析以及細(xì)胞定位研究等。

特性：一種堿性熒光染料，可透過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞，與細(xì)胞內(nèi)的 DNA 和 RNA 結(jié)合。在不同的酸堿度環(huán)境下，AO 與 DNA 和 RNA 結(jié)合后發(fā)出不同顏色的熒光。在 pH 7.4 的環(huán)境中，AO 與雙鏈 DNA 結(jié)合發(fā)出綠色熒光，與單鏈 RNA 結(jié)合發(fā)出紅色熒光，激發(fā)波長(zhǎng)為 488nm，發(fā)射波長(zhǎng)分別為 530nm（綠色）和 640nm（紅色）。

優(yōu)點(diǎn)：能同時(shí)對(duì)細(xì)胞中的 DNA 和 RNA 進(jìn)行染色，通過觀察不同顏色的熒光，可了解細(xì)胞內(nèi)核酸的分布和狀態(tài)。

應(yīng)用：常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)、細(xì)胞自噬研究以及區(qū)分正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等。在細(xì)胞凋亡過程中，細(xì)胞核內(nèi)的 DNA 會(huì)發(fā)生斷裂，由雙鏈變?yōu)閱捂?，吖啶橙染色后可觀察到細(xì)胞核由綠色熒光變?yōu)榧t色熒光。