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如何操作顯微操縱器的要求，你知道嗎？

閱讀：1258 發(fā)布時(shí)間：2022-6-27

　　顯微操縱器采用顯微操作系統(tǒng)將供體物直接注入宿主細(xì)胞中，研究供體物的功能或者獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物的技術(shù)。顯微操作時(shí)顯微鏡的觀察方式通常選擇浮雕相襯觀察方式，原因在于浮雕相襯系統(tǒng)能夠產(chǎn)生高反差的3D圖像，便于微操作手對(duì)樣品精準(zhǔn)的三維空間捕獲及操控，如在細(xì)胞核膜可以更容易看到的情況下進(jìn)行穿刺。在使用顯微操縱器的使用我們要注意什么呢？

　　1、在整個(gè)過程中，注射針尖應(yīng)遠(yuǎn)離人員和實(shí)驗(yàn)室中的儀器。注射針在持針器上安裝不牢時(shí)，注射器、管子及注射針內(nèi)的壓力，可能將注射針射出。

　　2、在反向充填液體時(shí)，適當(dāng)?shù)卦陲@微鏡下觀察注射針尖，以決定在加壓時(shí)是否注射針阻塞或偏斜。阻塞通常可通過將針尖輕輕敲擊一個(gè)固定物而得以緩解。針尖偏斜的注射針是適合于顯微注射的，但其使用應(yīng)做細(xì)微調(diào)整或補(bǔ)償注射中加壓所造成的額外偏斜。

　　3、注射速度過快能擾亂細(xì)胞質(zhì)成分，細(xì)胞裂解或細(xì)胞從底層移位。當(dāng)注射體積小于估計(jì)的細(xì)胞體積的10%，并且注射樣品的流動(dòng)速度幾乎不導(dǎo)致可見的細(xì)胞質(zhì)移位時(shí)，注射效果好。

　　4、用紫外光可看到注入標(biāo)記物后的活細(xì)胞，但會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可恢復(fù)的損傷，因此應(yīng)盡可能縮短紫外光照射時(shí)間。

　　5、如果對(duì)已經(jīng)注射的細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光測(cè)定或其他處理，最好使用可固定的葡聚糖，以防在沖洗中造成標(biāo)記物的擴(kuò)散損失。

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