CELL-WISE 293 培養(yǎng)基（貨號(hào)：CW001）具體說(shuō)明

產(chǎn)品特性

• 應(yīng)用場(chǎng)景：專為HEK293 細(xì)胞（如 293-F、293-T、Expi-293F 等）的高密度懸浮培養(yǎng)及瞬時(shí)轉(zhuǎn)染設(shè)計(jì)，支持細(xì)胞高效擴(kuò)增與外源基因表達(dá)。

• 成分優(yōu)勢(shì)：

• 無(wú)蛋白、無(wú)動(dòng)物源成分、化學(xué)成分wan全限定，排除血清批次差異及病毒污染風(fēng)險(xiǎn)，保障實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性與可重復(fù)性。

• 即用型配方，無(wú)需額外添加成分，開(kāi)瓶后可直接使用，簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作流程。

技術(shù)參數(shù)

產(chǎn)品用途

僅限科學(xué)研究使用（如重組蛋白生產(chǎn)、病毒載體包裝等），嚴(yán)禁用于人類或動(dòng)物的診斷、治療及臨床應(yīng)用。

細(xì)胞馴化操作指南

一、直接馴化（適用于多數(shù)細(xì)胞株）

若細(xì)胞已適應(yīng)無(wú)血清懸浮培養(yǎng)體系，可直接通過(guò)常規(guī)傳代稀釋更換為 Balance CD 293 培養(yǎng)基，無(wú)需逐步過(guò)渡。

二、漸進(jìn)式馴化（適用于敏感細(xì)胞或傳統(tǒng)培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞）

注意事項(xiàng)：選擇 ** 低代次（≤P10）、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（活率 > 95%）** 的細(xì)胞進(jìn)行馴化。

操作步驟：

1. 基礎(chǔ)傳代階段

• 在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞，連續(xù)傳代2~3 次至生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定。

• 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 2×10? cells/mL 時(shí)，以 0.5~0.6×10? cells/mL 的密度傳代，使用 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance       CD 293 培養(yǎng)基 的混合體系。

2. 培養(yǎng)條件

• 環(huán)境：37℃，5% CO?，恒溫?fù)u床轉(zhuǎn)速 110~175 rpm（根據(jù)培養(yǎng)體積調(diào)整）。

3. 比例遞增階段

• 培養(yǎng) 3~4 天后，若細(xì)胞密度達(dá) 3×10? cells/mL 且活率 > 90%，傳代時(shí)調(diào)整混合比例為 50% 原培養(yǎng)基 + 50% Balance       CD 293 培養(yǎng)基，接種密度維持 0.5×10? cells/mL。

• 若細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢：可離心保留 20% 條件培養(yǎng)基，加入 80% 新配的 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance       CD 293 培養(yǎng)基 繼續(xù)培養(yǎng)。

4. wan全切換階段

• 重復(fù)上述步驟，逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例（如 25:75→10:90），直至wan全使用 100% 目標(biāo)培養(yǎng)基。

5. 適應(yīng)驗(yàn)證

• 細(xì)胞在 100% 培養(yǎng)基中傳代3~4 次后，若密度達(dá) 2~3×10? cells/mL 且活率 > 90%，即完成馴化。

• 后續(xù)傳代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL，建議再傳代2~3 次后進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。

重要提示：

• 馴化初期（前 3 代）細(xì)胞狀態(tài)可能波動(dòng)，通常從第 4 代起逐漸改善。

• 馴化過(guò)程中需定期監(jiān)測(cè)細(xì)胞密度、活率及形態(tài)，避免污染或代謝物積累影響細(xì)胞適應(yīng)。