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江蘇維林科生物技術有限公...

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使用生物原子力顯微鏡可以進行細胞觀察

閱讀:1347      發(fā)布時間:2022-11-18
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   生物原子力顯微鏡是一種以物理學原理為基礎,通過掃描探針與樣品表面原子相互作用而成像的新型表面分析儀器。利用一個很尖的探針對樣品掃描,探針固定在對探針與樣品表面作用力極敏感的微懸臂上。懸臂受力偏折會引起由激光源發(fā)出的激光束經(jīng)懸臂反射后發(fā)生位移。檢測器接受反射光,最后接受信號經(jīng)過計算機系統(tǒng)采集、處理、形成樣品表面形貌圖像。
 
  1、對細胞和細胞器的觀察
 
  原子力顯微鏡Z重要的特點是,在接近自然生理條件下,可以在原子和分子水平研究生物組織結構;測量表面的粘彈性、摩擦力等,因此,可以獲得更多信息。利用相應的軟件,對得到的圖像進行量化分析處理,可以得到細胞細胞器的厚度、寬度、表面積、體積及其特征比較等量化參數(shù)。
 
  通常細胞可以很好的吸附在基底上,不會被探針推走。到目前為止原子力顯微鏡觀測細胞的分辨率一般為20~50nm,雖不足以分辨出細胞表面的蛋白,但可以觀測到質膜的重排、骨架的移動等。
 
  2、對細胞形態(tài)變化的動態(tài)觀察
 
  原子力顯微鏡能夠對活細胞在生理、病理條件下,跟蹤形態(tài)結構的變化,進行動態(tài)觀察。改變活細胞溶液的環(huán)境,如pH值、離子濃度等參數(shù),引發(fā)細胞形態(tài)結構的改變,利用原子力顯微鏡進行動態(tài)觀察。例如,對于飽和PC雙層膜,少量的tris可以產(chǎn)生波紋相,證明了溶液中的分子是細胞波紋相存在的重要因素。而在此之前,一般認為波紋相是磷質脂質體固有的性質。
 
  3、生物大分子超微細結構的觀察
 
  原子力顯微鏡成像的意義,不僅能夠在分子水平了解大分子形態(tài),更重要的是在成像的基礎上,用原子力對生物大分子的其它性能進行研究,如抗原-抗體之間的作用力,生物膜的親疏水性等的研究。

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