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加州大學(xué)欒升、蘭大何凱:NMT發(fā)現(xiàn)AtPiezo介導(dǎo)植物根冠Ca2+

閱讀:568        發(fā)布時(shí)間:2021-1-27

 NMT作為生命科學(xué)底層核心技術(shù),是建立活體創(chuàng)新科研平臺(tái)的*技術(shù)。2005年~2020年,NMT已扎根中國(guó)15年。2020年,中國(guó)NMT銷往瑞士蘇黎世大學(xué),正式打開歐洲市場(chǎng)。

 

基本信息

主題:NMT發(fā)現(xiàn)AtPiezo介導(dǎo)植物根冠Ca2+流響應(yīng)機(jī)械力

期刊:International Journal of Molecular Sciences

影響因子:4.556

研究使用平臺(tái):NMT機(jī)械刺激信號(hào)研究創(chuàng)新平臺(tái)

標(biāo)題:AtPiezo Plays an Important Role in Root Cap Mechanotransduction

作者:加州大學(xué)伯克利分校欒升,蘭州大學(xué)何凱、Xianming Fang

 

檢測(cè)離子/分子指標(biāo)

Ca2+

 

檢測(cè)樣品

擬南芥根冠(距根尖0 μm根表上的的點(diǎn))

 

 

中文摘要(谷歌機(jī)翻)
 
植物在生長(zhǎng)發(fā)育過程中會(huì)遇到各種各樣的機(jī)械刺激。目前認(rèn)為,機(jī)械敏感離子通道在植物對(duì)機(jī)械力的初始感知中起著至關(guān)重要的作用。近十年來,動(dòng)物機(jī)械敏感離子通道Piezo的研究取得了重大進(jìn)展。事實(shí)證明,在動(dòng)物的各種生理過程中,機(jī)械力的感知是*的。然而,目前對(duì)其同源物在植物中的功能還知之甚少。本研究通過對(duì)AtPiezo基因在模式植物擬南芥中的功能研究,發(fā)現(xiàn)AtPiezo在植物根冠對(duì)機(jī)械力的感知中起作用,Ca2+的流動(dòng)參與了這一過程。這些發(fā)現(xiàn)有助于我們從植物的角度理解AtPiezo的功能,并為植物根冠響應(yīng)機(jī)械刺激的機(jī)制提供新的見解。

 

 

離子/分子流實(shí)驗(yàn)處理

 

5日齡擬南芥幼苗

 

 

離子/分子流實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

在動(dòng)物體內(nèi),Piezo蛋白作為非選擇性陽離子內(nèi)流離子通道發(fā)揮作用。特別是Piezo蛋白主要介導(dǎo)Ca2+的流速。研究使用非損傷微測(cè)技術(shù)(NMT)來檢測(cè)根冠中Ca2+的流速(圖1A)。在液體測(cè)試環(huán)境中,研究發(fā)現(xiàn)WT根冠處的凈Ca2+內(nèi)流速率明顯高于atpiezo突變體的內(nèi)流速率(圖1B, C)。這些結(jié)果表明AtPiezo可能影響根冠中Ca2+的流動(dòng)。

圖1. AtPiezo影響植物根冠Ca2+流速。(A)采用NMT測(cè)量Ca2+速率的位置示意圖。(B)在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)5天的Col-0、piezo-1piezo-c1幼苗的凈Ca2+速率。(C)根冠Ca2+流速的實(shí)時(shí)變化情況

 

 

其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 
  • 本研究在篩選的37種代表性的植物中都發(fā)現(xiàn)了Piezo基因,并且Piezo蛋白的C端結(jié)構(gòu)域是保守的。

  • AtPiezo在擬南芥根和幼葉中高度表達(dá)。在幼苗的根中,AtPiezo在根維管系統(tǒng)和根尖中特異性表達(dá)。根尖的橫截面顯示AtPiezo主要在根冠中表達(dá)。RT-PCR的結(jié)果與GUS染色結(jié)果一致。

  • AtPiezo可能影響植物根系對(duì)培養(yǎng)基表面力的響應(yīng)。

  • 當(dāng)擬南芥在含有0.8%瓊脂的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),atpiezo突變體中螺旋根和側(cè)根的數(shù)量都比WT多。

  • 研究推測(cè)atpiezo突變體的根冠對(duì)機(jī)械力的敏感度較低,導(dǎo)致根冠形態(tài)發(fā)生改變,可能會(huì)影響根的生長(zhǎng)方向,決定根的結(jié)構(gòu)。

 

 

結(jié)論

 

本研究認(rèn)為AtPiezo在根系對(duì)機(jī)械力的響應(yīng)中起重要作用。AtPiezo作為一種潛在的陽離子通道,可能在不同的機(jī)械刺激下影響Ca2+的轉(zhuǎn)運(yùn)。Ca2+調(diào)控根中多個(gè)下游生物事件,如根尖的生長(zhǎng)發(fā)育和根冠形態(tài)。AtPiezo基因的缺失導(dǎo)致植物對(duì)根系機(jī)械力的響應(yīng)中斷。
進(jìn)一步確定AtPiezo的功能,本研究克隆了AtPiezo基因的CDS序列,長(zhǎng)度為7455 bp。經(jīng)過多次嘗試,在一株特殊的細(xì)菌菌株EPI400中成功構(gòu)建了植物表達(dá)載體。但AtPiezo基因的表達(dá)載體不能在農(nóng)桿菌中存在。因此,本研究尚未獲得AtPiezo基因的轉(zhuǎn)基因株系。
AtPiezo不僅在根冠中高表達(dá),而且在維管組織、保衛(wèi)細(xì)胞和花粉中也有表達(dá)。進(jìn)一步的研究將集中于AtPiezo在這些組織中作用的研究。本文目前對(duì)AtPiezo的研究揭示了植物與動(dòng)物之間Piezo作用的異同。它使我們更好地了解植物對(duì)機(jī)械力的響應(yīng)過程。

 

 

測(cè)試液

 

0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.0

 

 

儀器采購信息

 
  • 據(jù)中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟了解,蘭州大學(xué)草科院、生科院分別于2016年、2019年采購了美國(guó)揚(yáng)格公司的非損傷微測(cè)系統(tǒng)。

 

關(guān)鍵詞:擬南芥;機(jī)械刺激;機(jī)械敏感離子通道;AtPiezo;根冠;Ca2+

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