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一. 轉(zhuǎn)化細(xì)胞傳代前準(zhǔn)備：

1.預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。

2.用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。

3.正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染。

4.點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小。

5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內(nèi)高火，8分鐘再次消毒。

6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液：取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)。

7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細(xì)胞。

8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。

二.轉(zhuǎn)化細(xì)胞胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗（沖洗），加入適量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，*消化溫度是37℃。

2. 顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度。

3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。
95%    Schaftoside    *：    夏佛塔苷    規(guī)格:
98%    curculigoside    *：    仙茅苷    規(guī)格:
98%    Adenosine    *：    腺苷    規(guī)格:
95%    alpha-Methyl-L(+)-tryptophan    *：    相思豆堿    規(guī)格:
98%    Vanillic acid    *：    香草酸    規(guī)格:
≥98%    coumarin    *：    香豆素    規(guī)格:
≥98%    Vanillin    *：    香蘭素    規(guī)格:
≥98%    Typhaneoside    *：    香蒲新苷    規(guī)格:
轉(zhuǎn)化細(xì)胞