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技術(shù)文章

讓轉(zhuǎn)化細胞快樂的十個訣竅

閱讀:547          發(fā)布時間:2018-6-12

  轉(zhuǎn)化細胞可是許多生物學實驗的主角。如果細胞長不好,那么實驗的結(jié)果也不會好到哪兒去。在此我公司技術(shù)人員介紹了讓細胞快樂的十個訣竅。細胞可是許多生物學實驗的主角。在此介紹了讓細胞快樂的十個訣竅。

1. 確保所有實驗室材料都無菌 交叉污染是細胞培養(yǎng)的大敵。即使是zui輕微的污染,也可能毀了幾個星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕,真菌極易生長,因此必須注意定期清潔。此外,在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺之前,應(yīng)用酒精擦拭干凈,以避免污染。 2. 小心處理您的培養(yǎng)物 細胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強調(diào)也不為過。劇烈搖晃,或連續(xù)的溫度波動可能會對生長產(chǎn)生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的,溫度均一,且遠離電動儀器。此外,盡量避免一次處理多個細胞系,因為它可能會影響細胞的基因型和表型。您還應(yīng)定期完成STR圖譜分析,以確認細胞系的身份。

3. 在使用前正確解凍細胞 盡管解凍看起來是個簡單的步驟,但必須操作得當,以免傷害細胞。長時間暴露在高溫條件下會使細胞無法鋪板。因此,凍存管應(yīng)當在37°C水浴中放置2分鐘,然后用條件培養(yǎng)基稀釋,以避免DMSO造成直接傷害。

4. 使用對數(shù)生長期的細胞 細胞培養(yǎng)過程共有3個階段:停滯期、對數(shù)期和平臺期,分別代表了低細胞生長、高細胞生長和無細胞生長。zui有活力的細胞是健康的,快速分裂的,在對數(shù)期以70-80%的匯合度存在。

5. 在傳代之前不要讓轉(zhuǎn)化細胞*匯合 匯合度是指貼壁細胞占據(jù)培養(yǎng)瓶表面積的比例。*匯合意味著100%的表面都被貼壁細胞覆蓋。一定要避免這種狀態(tài),因為它意味著細胞不能繼續(xù)生長。不過,當務(wù)之急是使用活躍生長的細胞。

250 mCPC Medium 用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標準) mCPC 培養(yǎng)基

1000ml Vibrio Chromogenic Medium 用于弧菌的顯色培養(yǎng),副溶血性弧菌顯藍色,其它弧菌顯無色。 弧菌顯色培養(yǎng)基

100 DNase Agar 用于核糖核酸酶檢測 DNA酶瓊脂   

100克 Toluidine Blue-O-Dnase Agar 用于核糖核酸酶測定 甲苯胺藍-DNA酶瓊脂

250 2216E Agar 用于海生細菌的培養(yǎng)和計數(shù) 2216E瓊脂

250 BPLS Agar 用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法) BPLS瓊脂

250 BPLS Agar,Modified 用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標準) 改良BPLS瓊脂

250 M-Broth 用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養(yǎng)(MERCK方法) M –肉湯

250 Differentia Clostridial Agar 用于干燥食品的計數(shù)和培養(yǎng)(MERCK方法) 梭菌鑒別瓊脂(DCA)

250 Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng),用前應(yīng)無菌加入多粘菌素B(SN標準) 氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)    
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