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中級(jí)會(huì)員·9年您現(xiàn)在的位置： 首頁(yè)> 公司動(dòng)態(tài)> 植物過(guò)氧化氫酶（CAT）ELISA試劑盒代測(cè)樣本需要注意的
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植物標(biāo)本的精采集及保存
1、 稱取0.1g（誤差±3%以內(nèi)）新鮮植物組織樣本，在液氮中充分研磨；
2、 加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度過(guò)夜；
3、 于4度，8000rpm，離心1小時(shí)，取上清；
4、 上清液過(guò)C-18固相萃取柱。具體步驟是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上樣→收集樣品→移開(kāi)樣品后用100%甲醇（5ml）洗柱→100%yimi（5ml）洗柱→100%甲醇（5ml）洗柱→循環(huán)。過(guò)柱后的樣本真空干燥或氮?dú)獯蹈?，保存?zhèn)溆茫?/span>
5、 上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液（1ml定容）?；靹蚝笫覝胤胖?0分鐘，然后4度離心（8000rpm，15分鐘），取上清并暫時(shí)保存于4度待用。
6.植物標(biāo)本中相關(guān)酶或蛋白的測(cè)定：（粗提?。?/span>
1、 新鮮植物組織請(qǐng)?jiān)谝旱谐浞盅心ィ?/span>
2、 加入樣品體積9倍的提取液（pH 7.4 PBS緩沖液）,3、 請(qǐng)于4度，8000rpm，離心30分鐘，取上清并暫時(shí)保存于4度待用。
樣本收集注意事項(xiàng)
1、不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
2、標(biāo)本采集后盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、我們羅列的是通用的樣本處理方法，無(wú)法涵蓋各種樣本，對(duì)于一些特殊樣本，建議實(shí)驗(yàn)人員多參考已發(fā)表的文獻(xiàn)，自行設(shè)計(jì)合理的樣本處理方法。
計(jì)算方法示例：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。將樣本的OD值為X值代入方程式，所得的Y值即是我們的樣本值。（如上圖所示）
