聯(lián)系電話
上海仁捷生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員·9年
- 聯(lián)系人：
- 霍經(jīng)理
- 電話：
- 021-60346444
- 手機(jī)：
- 17302193538
- 地址：
- 上海市楊浦區(qū)鐵嶺路32號(hào)1519-10室
- 個(gè)性化：
- www.shrjkit.com
- 網(wǎng)址：
- www.shrjbio.com
掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
測(cè)定意義：線粒體復(fù)合體Ⅲ（EC 1.10.2.2）又稱CoQ-細(xì)胞色素C還原酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分，負(fù)責(zé)把還原型CoQ的氫傳遞給細(xì)胞色素C，生成還原型細(xì)胞色素C。
測(cè)定原理：與氧化型細(xì)胞色素C不同，還原型細(xì)胞色素C在550nm有特征光吸收，因此550nm光吸收增加速率能夠反映線粒體復(fù)合體Ⅲ酶活性。
需要的儀器，耗材:可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣本處理
1、 稱取約0.1g組織或收集500萬(wàn)細(xì)胞，加入1.0 mL提取液，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
2、 4 ℃ 600 g離心10min。將上清液移至另一離心管中，4 ℃ 11000 g離心15min。
3、 上清液即胞漿提取物，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的復(fù)合體Ⅲ（此步可選做，可以判斷線粒體提取效果）。
4、 在沉淀中加入200μL提取液，超聲波破碎（功率20%，超聲5秒，間隔10秒，重復(fù)15次），用于復(fù)合體Ⅲ酶活 性測(cè)定，并且用于蛋白含量測(cè)定。
