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技術(shù)文章

NADH氧化酶(NOX)測試盒?樣本處理及要求

閱讀:307          發(fā)布時間:2021-11-24

NADH氧化酶(NOX)測試盒樣本處理及要求:


1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。


3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。


4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到


100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融.


7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞

SF9, 昆蟲卵巢細胞

BRL 3A, 大鼠肝正常細胞

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞

HET-1A, 人食管上皮細胞

RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞

GC-1, 鼠精原細胞

293A,人胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別)

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞

293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細胞系

EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細胞

HBE, 正常人支氣管上皮細胞系

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞

HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系

HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞

HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞


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