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CRF elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟：

1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。
注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 100ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 100ul 的蒸餾水；其余微孔中加入100ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 50ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。

試劑使用須知：
（1）請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn)、MSDS等信息，理解并掌握好試劑的特性，再進(jìn)行安全操作。
（2）通常購(gòu)買(mǎi)試劑時(shí)一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話，更加注意其他保管和管理。
（3）萬(wàn)一試劑操作者并非專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。必須在專(zhuān)業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對(duì)于使用后的廢棄物，不要或者舊的試劑，應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
（4）購(gòu)買(mǎi)后，請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)；做好預(yù)防顛倒，摔壞的措施和管理體制；在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)，做好必要的安全對(duì)策；對(duì)沒(méi)有標(biāo)明其危害特性、有害特性的，也要慎重地進(jìn)行操作；必須帶好防護(hù)用具，小心翼翼進(jìn)行操作。