類器官模型因其能夠再現真實組織的復雜性而在生物研究和篩選中越來越受歡迎。為了模擬體內的人體肺器官，我們在有助于 3D 結構形成的條件下培養(yǎng)了原代人肺上皮細胞，重現了肺氣道形態(tài)和功能上的特征。在肺類器官培養(yǎng)中，上皮干細胞和祖細胞在添加了一系列生長因子的 ECM 中培養(yǎng)。類器官隨后生長成復雜的結構，保留了多系上皮細胞簇。這些特性使類器官培養(yǎng)成為一種富有前景的手段，可以廣泛應用于基礎和轉化方法，如藥物篩選和疾病建模。
這里我們闡述了一種高內涵成像方法，可以監(jiān)測和可視化肺類器官的生長和分化，3D 結構的重建，類器官結構的復雜分析，細胞形態(tài)和活力，以及不同細胞標記物的表達。3D 肺類器官植入在 Matrigel domes。發(fā)育中的類器官包括具有復雜形態(tài)的球形物體，包括腔和膀胱結構。在 8 周的生長過程中，我們監(jiān)測到了大小和復雜性的增加。用透射光監(jiān)測類器官，然后用 20-30 層 Z 軸掃描透過基質凝膠對染色的類器官成像，物鏡倍數為 10 – 40x。使 用 ImageXpress® Confocal HT.ai 智能化共聚焦高內
 涵成像分析系統(tǒng)新配置的激光光源顯著的提高照明強度，從而顯著提高了亮度、檢測靈敏度和成像速度。