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牛垂體提取物是角朊細胞無血清培養(yǎng)的重要添加成分

閱讀:1960      發(fā)布時間:2019-9-24
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  牛垂體提取物(BPE)是由牛腦垂體制備的提取物,有研究表明BPE具有明顯改善人垂體腺瘤細胞體外無血清培養(yǎng)條件的作用,對離體培養(yǎng)的垂體腺瘤細胞增殖具有促進作用。常用作無血清細胞培養(yǎng)的生長補充劑,可促進上皮細胞、內(nèi)皮細胞和黑色素細胞增殖,廣泛用作各種上皮細胞和黑色素細胞培養(yǎng)中的補充劑。此外,其具有抗氧化能力,可對抗過氧化氫誘導(dǎo)的細胞壞死,蛋白質(zhì)氧化,膜破碎和DNA損傷。
  BPE是無血清的促有絲分裂添加劑,含有天然生長因子的*混合物,可與MCDB系列(MCDB170或MSDB154)或DMEM/Ham'sF12的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組合使用。牛垂體提取物是角朊細胞無血清培養(yǎng)的重要添加成分。
  對于單層中上皮細胞的生長,推薦濃度為35?70ug/mlBPE。通過使用優(yōu)化的基礎(chǔ)培養(yǎng)基如MCDB170或MCDB154,濃度可以降低。確定*BPE濃度的有效方法是在選擇的細胞上進行簡單的生長測定。建議將產(chǎn)品分裝成單次使用體積,以避免反復(fù)凍融所引起的可能活性損失。BPE以溶液的形式提供,凍干粉會降低其生物活性。
  生長因子參與調(diào)節(jié)嗅鞘細胞增殖、分化及代謝功能,因此有望通過應(yīng)用其合理的序貫刺激形式,達到細胞數(shù)量地大量擴增。目的:觀察牛垂體提取物、堿性成纖維細胞生長因子及Forskolin對嗅鞘細胞增殖的影響及劑量-效應(yīng)關(guān)系。方法:采用原代培養(yǎng)技術(shù),從新生大鼠的嗅球分離培養(yǎng)嗅鞘細胞,并用差速貼壁+化學(xué)藥物+胰酶快速消化法純化培養(yǎng)嗅鞘細胞,添加牛垂體提取物、堿性成纖維細胞生長因子及Forskolin3種促增殖因子及其組合。MTT法檢測各組嗅鞘細胞生長的情況。

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