10
小容量搖瓶機在菌種培養(yǎng)中的使用方法
在進行小容量搖瓶機試驗前，首先檢查小容量搖瓶機各部件，檢查氣源、電源、管路、壓力表、密封等是否正常，要求實驗人員在操作前必須對小容量搖瓶機的各個按鈕，流程熟練掌握，詳細閱讀搖瓶機說明書，及實驗室儀器安全操作規(guī)程。掌握了小容量搖瓶機的基本操作要領后，逐步按以下步驟進行搖瓶機細菌培養(yǎng)試驗：
1、小容量搖瓶機復蘇：
根據(jù)所培養(yǎng)的細菌選擇適宜的培養(yǎng)基，大部分細菌在LB培養(yǎng)基中在超凈工作臺先用1毫升左右的適宜的培養(yǎng)基溶解冷凍菌，然后轉移到10毫升中試管（放入4毫升液體培養(yǎng)基）中，一般在37攝氏度搖床靜止或低轉速培養(yǎng)12小時或者過夜（溫度取決于所培養(yǎng)的細菌適宜生長的溫度）。
2、搖瓶機平板劃線培養(yǎng)：
在平板（瓊脂+液體培養(yǎng)基）劃線，放37攝氏度培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)6小時~12小時，在平板上觀察是否形成了單菌落。
3、小容量搖瓶機挑單菌落：
在超凈臺中挑選典型單菌落，置入10毫升中試管（內(nèi)有5毫升液體培養(yǎng)基）中，在37攝氏度搖床，轉速200轉培養(yǎng)12小時或者過夜，肉眼能看到試管渾濁。
4、小容量搖瓶機按照1：20的比例將中試管中的菌液移到250毫升三角瓶（放入100毫升液體培養(yǎng)基），培養(yǎng)條件同前。注意：所有的接種操作均需要在層流罩中，培養(yǎng)基應無菌。