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應用細胞融合技術制備染色體2017/7/18
原代細胞實驗目的通過細胞融合技術，初步了解染色體提前凝集標本制備原理、方法及間期細胞三種時相的提前凝集染色體特點?！緦嶒炗闷贰恳弧⒉牧先藢m頸癌上皮細胞(HeLa細胞)二、器材和儀器顯微鏡、離心機、水浴...
細胞培養(yǎng)過程中添加劑起到的作用2017/7/13
腫瘤細胞能量來源：谷氨酰胺L－谷氨酰胺是一種氨基酸，細胞的重要能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。同時L-谷氨酰胺不穩(wěn)定，在中性的水溶液中會自發(fā)降解；降解產(chǎn)物對細胞有毒性（對干細胞，原代細胞影響尤其...
細胞培養(yǎng)技術注意事項2017/7/11
1.原代細胞實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作...
原代細胞復蘇技術2017/7/6
1.原代細胞凍存復蘇技術簡介在ELISPOT檢測的應用中，往往需要用到凍存的淋巴細胞樣品作為檢測細胞。由于ELISPOT檢測的是細胞的免疫功能，不僅僅需要保持細胞的存活率，而且還要保證細胞的功能不發(fā)生...
細胞常見的保存方法2017/7/4
原代細胞保存溫度越低，保存時限更長；溫度越低，對細胞傷害越大；低溫也不怕，我有防凍劑（e.g.甘油）。下面的表格就是五種常見保存細菌細胞的方法和大約時限。保存條件溫度°C大約時間瓊脂平板44-6周（A...
細胞同步化實驗操作步驟2017/6/29
在腫瘤細胞培養(yǎng)過程中，細胞多處于不同的細胞周期時相中。不同時相的細胞對藥物干預存在不同的反應，會影響實驗的重復性，因此需要制備細胞周期一致的細胞。細胞同步化是解決該問題的好辦法。細胞同步化是利用藥物或...
細胞懸液標本制備實驗步驟2017/6/27
細胞系懸液標本制備實驗步驟(1)取材：收集對數(shù)生長期細胞于離心管中，800～1000r／min離心10min，棄上清，彈指法混勻細胞。沿管壁加入2．0％～2．5％冷戊二醛，輕輕吹打，4℃固定30min...
原代細胞培養(yǎng)注意事項2017/6/22
原代細胞培養(yǎng)：1、實驗材料要新鮮，從活體分離材料后要低溫保存，并盡快進行細胞分離實驗。2、無菌操作。操作時用的培養(yǎng)液，可加平時細胞培養(yǎng)液5倍含量的青鏈霉素。3、用酶法分離細胞時，注意酶液的濃度和控制消...
腫瘤細胞凍存保護劑2017/6/20
腫瘤細胞很多化合物都可以作為凍存保護劑，它們既可以單獨使用也可以聯(lián)合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有的準則，但是大家普遍認為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保護活細胞和組織使用zui廣泛且zui...
人類外周血淋巴細胞的培養(yǎng)方法2017/6/15
實驗原理染色體是在顯微鏡下可見細胞系有絲分裂過程中出現(xiàn)的結構。因此，必須獲得染色體標本才能進行檢查分析，通常情況下，都是利用外周血淋巴細胞進行核型分析。正常情況下，人體外周血淋巴細胞不再分裂，但植物血...
細胞長期保存的方法2017/6/13
細胞系長期低溫冰凍必然會導致部分細胞死亡，而且很多時候我們要把細胞樣本拿來重新接種做實驗，所以解凍再凍的過程也會導致細胞死亡。那么起始樣本的細胞濃度就要達到一定的高度，這樣在以后保存的過程中就算死亡一...
原代細胞培養(yǎng)過程可能出現(xiàn)的問題及解決辦法2017/6/8
原代細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞不貼壁、生長緩慢、生長不好，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞不貼壁可能原因：●胰蛋...
細胞株培養(yǎng)時消毒滅菌的方法2017/6/6
細胞株嚴格的消毒滅菌對保證細胞培養(yǎng)的成功是極為重要的，其方法分為物理法和化學法兩類。前者包括干熱、濕熱、濾過、紫外線及射線等，后者主要指使用化學消毒劑等。①熱滅菌：玻璃器皿，160~170℃，90~1...
ATCC細胞株解凍和培養(yǎng)操作推薦2017/6/1
凍存的ATCC細胞株和雜交腐細胞株在運送過程中使用干冰保持低溫。收到細胞后，可以立即解凍復蘇，去除二甲基亞砜（DSMO0）后進行細胞培養(yǎng)。如果不立即復蘇培養(yǎng)細胞，必須將細胞凍存管放置于液氮罐氣相層儲存...
原代細胞保存的主要方法之一細胞凍存2017/5/25
利用凍存技術將原代細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其...
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