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人嗜鉻蛋白A(CgA)免疫組化試劑盒實驗步驟

時間:2021/12/9閱讀:587
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人嗜鉻蛋白A(CgA)免疫組化試劑盒實驗步驟:


1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度


2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;


3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%乙醇2 min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min;


4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附1)* 注:有些抗原勿需修復,

直接進入第5 步封閉。

5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;


6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜;


7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);


8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;


9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min;


10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);


11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;


12.加HRP-SA: 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37℃濕盒中孵育30 min;


13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);


14.顯色:應用DAB 溶液(試劑F)顯色;


15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;


16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;


17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。

自噬相關蛋白9A抗體

醛縮酶C抗體

谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體

?;o酶A脫氫酶長鏈抗體

?;o酶A脫氫酶中鏈抗體

酰基輔酶A脫氫酶短鏈抗體

過氧化物酶?;o酶A氧化酶1抗體

磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白3抗體(半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1)

有絲分裂激酶A/B/C抗體

蛋白酪氨酸激酶ATK抗體

長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體

過氧化物酶?;o酶A氧化酶2抗體

膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體

磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體

磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體

磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體

磷酸化腎上腺素能受體β2抗體

APS抗體

激活素受體樣激酶1抗體

激活素A受體1B抗體

磷酸化雄激素受體抗體


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