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鴻朗科技帶您了解22種氨基酸的分析測定方案
閱讀：2142 發(fā)布時間：2018-4-17
氨基酸
氨基酸作為構成人體的蛋白質的基本單元，同時也是生物機體所需要的重要營養(yǎng)素。它們在機體內具有各自*的營養(yǎng)功能，在代謝過程中又密切，共同參加、推動和調節(jié)生命活動。氨基酸分子中含有氨基和羧基及其他取代基團，因此氨基酸分子為極性水溶性分子，在反相色譜柱上保留較弱，無法直接進行分析。
常用的分析方法有離子交換分離后直接或間接分析，但操作復雜，部分氨基酸無法分離導致結果準確度差，或者將氨基酸衍生后采用反相色譜法分離與紫外或熒光聯(lián)合分析，方法簡單，但檢測靈敏度受衍生過程控制，且樣品基質對分離效果影響較大。
石墨化碳柱（PGC）為新型的色譜柱填料，由于其具有特異的保留機理，可用于分離在反相色譜柱上無法保留的極性化合物，如氨基酸、碳水化合物等。本實驗采用石墨化碳柱直接分離氨基酸，采用蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）進行定量分析來測定氨基酸的含量。
色譜條件：
色譜柱：Hypercarb 2.1×100mm,5 μm
（貨號：35005-102130）
流動相：A：20mM 九氟戊酸（NFPA）（水溶液）；B：CAN
流速：0.2mL/min
檢測器：ELSD（55℃，2.2Bar）
柱溫：10℃
結論
采用石墨化碳黑（PGC）色譜柱和ELSD檢測器無需衍生化操作即可直接分析22種氨基酸。