01 適用范圍
適用于配合飼料、濃縮飼料和添加劑預(yù)混合飼料中土霉素的測定（該實(shí)驗(yàn)選用基質(zhì)添加劑預(yù)混合飼料）。
本標(biāo)準(zhǔn)不適用于添加尿素的飼料。
參考標(biāo)準(zhǔn)：《GB/T 30945-2014 飼料中泰樂菌素的測定 高效液相色譜法》
02 提取步驟
稱取試樣2g（j確至0.01g），于50mL具塞離心管中，加入25mL二氯甲烷，渦旋混勻，超聲提取20min，于5000r/min離心3min，用快速濾紙過濾，收集于100mL濃縮瓶中，于45℃旋蒸至干，加入0.5mL甲醇，用4.5mL乙酸鈉緩沖液多次潤洗濃縮瓶，洗液合并入15mL離心管中，加入5mL正己烷，渦旋混勻，4000r/min離心5min，棄去正己烷層，下層水相待凈化。
03 凈化
SPE小柱：Welchrom® BRP，規(guī)格：200mg/3mL。
活化：5mL甲醇，5mL水，棄去；
上樣：全部上樣，棄去；
淋洗：5mL水；
洗脫：6mL甲醇；
洗脫液于40℃氮吹至干，加入1mL50%乙腈水，過0.22μm濾膜，待測。
04 色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate® XB-C18,4.6×250mm,5μm。
流動(dòng)相：乙腈-甲醇-磷酸二氫銨沖液-水=70:50:20:60；
流速：1.0mL/min；
柱溫：30℃；
進(jìn)樣量：20μL；
檢測波長：290nm。
05 色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果
08 相關(guān)產(chǎn)品信息
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