切片組織得到很好處理后在進(jìn)行切片之前還應(yīng)對玻璃片進(jìn)行處理，由于我們檢測抗原是多種多樣的，因染色操作程序復(fù)雜，時間較長，有些抗原是要進(jìn)行各種抗原修復(fù)處理，如微波、高壓、水溶酶等，玻片如果得不到很好的處理，將易造成脫片，為保證免疫組化實驗的正常進(jìn)行，要求在貼片前對載玻片作適當(dāng)處理，必須在清洗干凈的玻片上進(jìn)行粘合劑的處理以防脫片。
1)Poly-L-Lysine 
一般采用分子量30000左右的0.5%多聚賴氨酸，也可用試劑公司出售的其濃溶液以1：10去離子水稀釋。方法是將玻片浸泡其中，傾盡余液，在60℃溫箱中烤干備用，此方法的優(yōu)點是可以用于多種組織化學(xué)、免疫組化及分子學(xué)檢測中的應(yīng)用，粘貼效果，但價格稍貴。
2)明膠硫酸鉻鉀法
將2.5g明膠加熱溶于500ml蒸餾水中，*溶解冷卻后加入0.25g硫酸鉻鉀攪勻充分溶解即可使用。方法是將玻片浸泡其中2 min，取出控盡液體入溫箱中烤干備用。此法價格便宜、方法簡單，任何實驗都可以使用，特別適用于大批量的使用，但應(yīng)注意，如果液體變藍(lán)或粘稠狀停用。
3)APES (3-氨丙基-乙氧基甲硅烷)
此法必須現(xiàn)用現(xiàn)配。將洗凈玻片入1:50丙酮稀釋的APES中，浸泡20s，取出稍停再入丙酮或蒸餾水中刷去末結(jié)合的APES晾干即可。用此方法粘合的玻片應(yīng)垂直烤片不能平拷，否則組織片中易出現(xiàn)氣泡。
  切片必須保持切片刀銳利，切片要薄而平整、無皺摺、無刀痕，如有上述問題的切片在進(jìn)行免疫組化染色都將出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，切片厚度一般為3~4μm，切好的切片在60℃溫箱中過一夜，注意烤片的溫度不宜過高，否則易使組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，而產(chǎn)生抗原標(biāo)記定位彌漫現(xiàn)象。