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血清儲存以及解凍注意事項
閱讀：10506發(fā)布時間：2021-12-7
需要長期保存的血清必須儲存于-20℃至-70℃低溫冰箱中，4℃冰箱中保存時間切勿超過一個月。
由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱，必須預留定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：
1、-20℃至-70℃血清低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天；
2、然后移入室溫或者可以置于37℃水浴中，不斷搖動待全部溶解后再分裝。
注意：
1、在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與血清成分均一，減少沉淀的發(fā)生；
2、切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀；
3、若一次無法用完一瓶，無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
1）血清化凍為什么是渾濁的？
血清制備過程中會保留部分纖維蛋白原，化凍過程中纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，使血清中出現(xiàn)渾濁，絮狀物。這種情況不影響血清的功效。
血清化凍過程中，在37℃水浴中放置時間過長，也會導致沉淀產(chǎn)生，沉淀物包含磷酸鈣結(jié)晶。沉淀物也不影響血清功效。
去除方法：
可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，將上清液加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。也可直接過濾血清以去除這些絮狀物。
2）血清熱滅活（除非必須，一般不建議作此熱處理）
血清為何要滅活？
血清熱滅活是將血清置于56℃水浴至*解凍。可滅活其中補體系統(tǒng)中具有蛋白酶活性的成分。補體是免疫系統(tǒng)的成分。對于那些培養(yǎng)困難的細胞、用于病毒檢測的細胞、用于細胞毒性檢測很重要，可避免補體帶來的不利影響。單熱滅活也破壞血清中的生長因子，所以除非必需，血清才滅活處理。
啟動的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究、培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。
血清滅活的正確方法
(1)按照前面的介紹正確化凍；
(2)水浴預熱56℃。水量要足夠，水深要超過瓶中血清的高度；
(3)輕輕搖動已解凍的血清，置于水浴中，水位可能會下降；
(4)待水溫重新到56℃時，再計時30分鐘；
(5)從水浴中拿出血清，待冷卻。-20/-70℃存放。
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