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如何讓ELISA試劑盒陽性判定值更準(zhǔn)確

閱讀:1057        發(fā)布時(shí)間:2017-3-24

ELISA試劑盒試驗(yàn)3個(gè)陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此計(jì)劃,則棄去,算了另兩個(gè)陰性對照從頭核算NCX;
如有兩個(gè)陰性對照A值超出以上計(jì)劃,則該次試驗(yàn)無效。
在條件許可下,應(yīng)該用比色計(jì)測定吸光值,這么能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。
現(xiàn)舉某種檢查 HBsAg的試劑盒為例。
先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進(jìn)行核算。
核算方法有多種,大致可分為陽性斷定值法和標(biāo)本與陰性對照比值法兩類。
陽性對照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng /ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽性對照和3個(gè)陰性對照。
ELISA試劑盒陽性斷定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對許多標(biāo)本的試驗(yàn)檢查而得到的。ELISA試劑盒陽性斷定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),以此作為區(qū)別作用陽性或陰性的規(guī)范。
用此法區(qū)別作用央求試驗(yàn)條件非常穩(wěn)定,試劑的制備有必要規(guī)范化,陽性和陰性的對照品應(yīng)符合一定的規(guī)范,須配用精密的儀器,并嚴(yán)重按規(guī)則操作。
ELISA試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,目視法簡捷明晰,但頗具主觀性。
測得A值后,先核算陰性對照A值的平均數(shù)(NC X )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)有必要大于一個(gè)特定的數(shù)值(例0.400),試驗(yàn)才有用。

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