5
當前位置：武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司>>技術(shù)文章>>PriCells: 正常人食管黏膜上皮細胞培養(yǎng)
PriCells: 正常人食管黏膜上皮細胞培養(yǎng)
PriCells: 正常人食管黏膜上皮細胞培養(yǎng)
實驗材料：
1. 一般采用活檢時獲得的正常食管黏膜組織
2. 不含Ca2+和Mg2+的1×HBSS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和1.5g/L慶大霉素，pH7.4
3. 手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪，眼科鑷
4. 離心管（15ml、50ml）
實驗方法：
1. 食管黏膜組織放入HBSS中，在解剖顯微鏡下分離黏膜與黏膜下組織，用HBSS沖洗2-3次，將黏膜剪成約1mm3大小的組織塊。
2. 1塊/cm2的密度將植塊放入培養(yǎng)皿中，上皮面朝下；也可在培養(yǎng)皿內(nèi)放入蓋玻片，將組織塊放在蓋玻片上培養(yǎng)。
3. 當組織塊貼壁后，加入適量培養(yǎng)液，培養(yǎng)液的量為能濕潤組織塊但不使組織塊浮起為宜，在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)。
4. 組織塊貼壁1-3d后，補充培養(yǎng)液。以后每隔2-3d換液1次。
5. 植塊培養(yǎng)3d后，細胞從植塊邊緣遷出。1周后，細胞向外遷移擴展，并逐漸分化，細胞的形態(tài)逐漸趨向正常食管黏膜上皮細胞的形態(tài)學特征?？拷矇K的細胞體積小，類似基底細胞。外側(cè)的細胞扁平，為分化的上皮細胞。2周后，細胞開始出現(xiàn)凋亡形態(tài)。3周后，近側(cè)細胞減少，甚至消失。剩余的大部分細胞呈分化狀態(tài)。
PriCells提供：
1. 各種原代細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基；
2. 各種原代細胞培養(yǎng)特制添加劑；
3. 原代細胞分離試劑盒；
4. 原代細胞鑒定試劑盒；
5. 各種原代細胞DNA；
6. 各種原代細胞RNA；
7. 各種原代細胞蛋白質(zhì)；