尿調(diào)素-慢性的有效標志之一

尿調(diào)素（Uromodulin）是一個由UMOD基因編碼的糖蛋白，是哺乳動物正常人體尿液中含量zui高的蛋白，主要來自哺乳動物腎臟亨氏袢。

尿調(diào)素單體的分子量約為85kDa, 它有幾種不同的異構(gòu)體。尿調(diào)素在尿液中以聚集體的形式存在，所以分子量可以達到幾百萬道爾頓。當pH低時，可析出形成凝膠。

針對尿調(diào)素分別進行了序列分析、選取Glu28~Glu149進行基因克隆和蛋白表達，獲得尿調(diào)素的重組蛋白，。用該蛋白作為免疫原分別免疫小鼠和兔后，獲得了單克隆抗體和多克隆抗體，以及生物素標記的多克隆抗體PAG918Hu71。這些抗體可用于WB、ICC、IHC-P、IHC-F、ELISA等實驗中。

利用已經(jīng)獲得的抗體，進行抗體配對，選取組裝成試劑盒的抗體組裝成試劑盒。試劑盒可用來檢測不同生物樣本中UMOD的含量。

現(xiàn)在研究表明，尿調(diào)素與妊娠、慢性腎臟疾病等都有重要關(guān)系，不孕和流產(chǎn)的婦女尿中UrM水平顯著高于正常人。故常見研究UMOD采用的樣本為尿液和精液。尿液和精液的處理辦法如下：

尿液樣本的處理方法：請收集清晨*次尿液（中段尿），或24小時尿液，2000×g離心15分鐘后收集上清，并將標本保存于-20oC，且應避免反復凍融。

精漿：精液標本收集于無菌容器中，室溫或37oC水浴箱中液化。待精液*液化后，將精液 4000 rpm離心10 min分離精漿。

處理好樣本后可進行上樣。以下是采用試劑盒測的的檢測數(shù)據(jù)，樣本包括尿液樣本和精液樣本。請見數(shù)據(jù)。

樣本采用的是100倍稀釋，采用雙標曲。

檢測原始數(shù)據(jù)OD(450nm-630nm）如下：

實驗室的樣本背景不詳，但體現(xiàn)出對于樣本良好的檢出性。同時復孔質(zhì)檢的差異小，標曲線性高于99%。

實驗結(jié)果以及各方數(shù)據(jù)表明了試劑盒的高質(zhì)量。而臨床對Uromodulin許多方面的功能有待進一步研究，.研發(fā)的蛋白、抗體以及Elisa試劑盒對Uromodulin的研究提供了必要的生物手段。