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淺談液相色譜中的低壓梯度和高壓梯度
液相色譜分析中，我們常會提到低壓梯度和高壓梯度，如最常見的四元低壓梯度和二元高壓梯度。那么四元低壓梯度和二元高壓梯度兩者有什么區(qū)別呢？
上面提到的四元低壓梯度和二元高壓梯度中的“元”指的是可以同時控制流路的個數(shù)，如下圖：
四元低壓梯度系統(tǒng)
圖上我們可以看出四元低壓系統(tǒng)是由單泵加四元低壓比例閥加在線脫氣機加混合器構(gòu)成，它最多可同時有四個流動相進入流路，按照預(yù)先設(shè)定的比例進行混合，依靠電磁閥的開閉，使泵分段輸送不同流動相。由于在常壓下混合，氣泡很容易從溶劑中析出，較易產(chǎn)生氣泡，配備在線脫氣機可消除氣泡影響，四元低壓梯度洗脫時，各流動相比例在儀器上進行設(shè)定之后，運行時按照用戶的設(shè)定通過控制電磁閥自動開閉自行改變流動相配比，將樣品中組分分離開來。
二元高壓梯度系統(tǒng)
二元高壓梯度配置是由雙泵加在線混合器構(gòu)成，工作方式為雙泵并聯(lián)，可同時有兩個流動相，按照預(yù)先設(shè)定的配比進入，在高壓下進行混合，混合配比更準(zhǔn)確，提高了工作效率。二元高壓梯度洗脫時，在分析過程中由兩個泵通過改變自身流速來自動改變流動相配比，將樣品中無法分離的物質(zhì)進行洗脫，在譜圖中得到分開峰的效果，有助于提高分析準(zhǔn)確性，避免遺漏重要物質(zhì)的檢測。
四元低壓和二元高壓對比
上圖可以看出四元低壓梯度系統(tǒng)采用單泵加梯度比例閥來實現(xiàn)，因為比例閥是在泵前的，并且各流路的溶劑在比例閥里就混合在一起，所以是泵前、低壓混合。二元高壓梯度的流量由每個泵單獨控制，精度更高，混合室在泵后，高壓下混合效率也高很多，梯度組成更精確。
另外，四元低壓梯度的混合比例是通過控制不同流路的電磁開閉時間長短來控制的，理論上混合的比例也是準(zhǔn)確的，但是實際上無論它動作多么快，總還是需要一點時間的。比如 A 路和 B 路各50％混合，在單位時間內(nèi)，A 路和 B 路的電磁各開通50％的時間，電磁的延遲影響可以通過調(diào)整補償系數(shù)來盡量彌補。但是如果極端一點的情況，A 路99%, B 路1%，這種情況下單位時間內(nèi)，A 路的電磁開通99%的時間，B 路只占1%，時間是很短的，這時 B 路電磁的延遲就影響很大了，這種情況建議使用高壓梯度。
此外，低壓梯度還應(yīng)注意清洗，尤其使用緩沖鹽時，電磁閥送液管路可能被堵住。一般地，對于常規(guī)分析來說，四元低壓梯度可以滿足需要；如果分析樣品成份復(fù)雜、對重現(xiàn)性要求較高，或者需要在低流量下進行梯度分析，還是選擇高壓梯度好一些。