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導(dǎo)語

說起MALDI-TOF（基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜）很多人都不陌生，通過“軟電離”方式與飛行時間質(zhì)譜的結(jié)合，可以快速檢測多肽、多糖、蛋白、聚合物、脂類等各種天然或合成有機分子的分子量，檢測成本低、前處理簡單、分析通量高、結(jié)果準確，廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)以及質(zhì)控管理等各類。

臺式MALDI-8020外觀

MALDI- 8020體積小巧，配備355 nm 200Hz固態(tài)激光器，支持離子源自清洗，軟件界面友好，適合實驗室的常規(guī)定性及定量檢測。

2018年，標準化組織（ISO）發(fā)布了利用MALDI-TOF MS檢測特征性多肽來進行紡織品中動物毛發(fā)纖維定性和定量分析的方法（ISO 20418-2: 2018），利用羊絨、羊毛蛋白酶解產(chǎn)物中角蛋白特征多肽峰的相對信號強度比值可以直接換算出羊絨、羊毛含量的比值。這種方法相比傳統(tǒng)的顯微觀察法，更加客觀準確、分析通量更高，同時也彌補了熒光定量PCR檢測DNA受損傷的樣品結(jié)果不準確的缺陷。下面我們來看下應(yīng)用臺式MALDI-TOF(MALDI-8020)檢測羊絨含量的具體的操作方法及結(jié)果。

表1. 羊絨與羊毛物種特異性I型角蛋白多肽位點

注：*代表C上發(fā)生烷基化修飾；紅色字母代表特征位點。

將羊絨、羊毛標準品按照一定比例混合，提取蛋白并酶解后，取酶解產(chǎn)物進行質(zhì)譜檢測，質(zhì)譜圖見圖1。

圖1. 羊絨羊毛混合標準品酶解產(chǎn)物一級質(zhì)譜圖

根據(jù)不同比例羊絨與羊毛混合標準品中的羊絨特征峰的相對信號強度的平均值與羊絨含量（%）建立校準曲線，結(jié)果見下圖。

圖2. 羊絨、羊毛混合物中羊絨含量的校準曲線

根據(jù)建立的校準曲線，測試經(jīng)檢測部門驗證過的實際樣品，樣品羊絨含量標注值及實測值統(tǒng)計結(jié)果見表2所示。由結(jié)果可知，實際樣品檢測結(jié)果與標注值一致，表明該方法可以用于羊絨制品中羊絨含量的檢測。

表2. 羊絨制品實際樣品檢測結(jié)果

當然，MALDI-TOF不止可以定量檢測羊絨、羊毛混合品中的羊絨含量，還可以利用其穩(wěn)定的定量能力應(yīng)用于臨床檢測與疾病的診斷、食品的摻假鑒別、基礎(chǔ)科學(xué)研究等領(lǐng)域，隨著研究人員的努力，MALDI-TOF的定量性能將在更多領(lǐng)域內(nèi)大放異彩。