物質(zhì)吸收由光源發(fā)出的某些波長的光可形成吸收光譜，由于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)不同，對光的吸收能力不同，因此每種物質(zhì)都有特定的吸收光譜，而且在一定條件下其吸收程度與該物質(zhì)的濃度成正比，分光光度法是利用物質(zhì)的這種吸收特征對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法。
使用前儀器要調(diào)零、調(diào)百校準(zhǔn)，參比溶液又稱溶液。測量時用作比較的、不含被測物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常，用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時，基體中雖不含被測物質(zhì)，但含有別的物質(zhì)，這時必須保證其不影響測試。經(jīng)常碰到的是試劑中含有被測物質(zhì)，此時必須經(jīng)過純化將其除去。否則將影響測定結(jié)果。在色譜分析中，有時基體中可能存在一個以上的和被測組分相距較遠(yuǎn)的色譜峰，計算機(jī)在數(shù)據(jù)處理中不會計入它們，不影響測定。
以所含鐵離子是多少為例：
參比溶液與測量溶液則相差鐵離子含量，在測量之前要用不含鐵離子的參比溶液掃描，調(diào)整儀器后(調(diào)100的過程)，然后再測量含鐵離子溶液的比色皿，這樣測量溶液中的鐵離子會形成自己特定的峰值，次峰值與數(shù)據(jù)庫里基準(zhǔn)峰值對比會得出溶液所含量了。如果數(shù)據(jù)庫中沒有鐵離子的曲線，你還要自己先用不同鐵離子濃度的溶液做工作曲線，然后進(jìn)行測量。
1、機(jī)器開關(guān)在機(jī)器的右側(cè)，按一下會打開，有個小的屏幕，可以按數(shù)字鍵來操作選項，測吸光值操作。
2、按數(shù)字鍵1，進(jìn)入選項，有當(dāng)前參數(shù)、吸光度等。
3、點(diǎn)擊鍵盤上的GOTO鍵去設(shè)置，一般設(shè)置為600，輸入直接按數(shù)字鍵則可以。輸入之后按ENTER這個鍵，這個是確認(rèn)鍵。
4、把樣品放到比色皿里面，留一個比色皿方蒸餾水，將蒸餾水的比色皿放到第yi個其余的依次放入。
5、蓋上一起的蓋子，拉環(huán)的位置正處于測定第yi個比色皿的位置，這一步需要?dú)w零，按鍵盤上的ZREO鍵。
6、歸零之后，開始依次用力拖動把手，顯示屏上會顯示出對應(yīng)的吸光度，依次紀(jì)錄數(shù)值，則能完成測定吸光值的實(shí)驗(yàn)。
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