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　　1、定量準(zhǔn)確、實驗耗時短

　　從探針法qPCR原理可以看出，擴增引物和探針序列都匹配后擴增的產(chǎn)物才能產(chǎn)生熒光信號，這樣就確保了熒光信號是目的片段的擴增產(chǎn)生的，排除了非特異性擴增的影響，特別是針對一些低拷貝和低濃度的樣品，檢測結(jié)果所見即所得，從而保證了檢測的準(zhǔn)確性。因探針法qPCR的高特異性，因此無需再設(shè)置熔解曲線檢測擴增產(chǎn)物的特異性如何，有效縮短了實驗時間。

 

　　2、特異性高

　　在探針法qPCR中，除加入引物外還增加一條特異性探針，當(dāng)引物和探針都與靶基因結(jié)合時，擴增時探針才會被水解酶切發(fā)出熒光。當(dāng)引物發(fā)生非特異性擴增時，探針不會結(jié)合到非特異性片段上，因此不會被水解酶切而發(fā)出熒光，從而提高了特異性。

 

　　3、兼容多重反應(yīng)

　　在探針的5'端標(biāo)記不同的熒光修飾，則不同的探針在檢測過程中就會發(fā)出不同的熒光信號。根據(jù)此原理可以將檢測不同目的基因或者基因型的探針標(biāo)記不同的熒光修飾做混合檢測，這樣就可以做多重檢測，檢測對應(yīng)的熒光信號就是檢測對應(yīng)探針的熒光定量結(jié)果。多重檢測大大節(jié)省了檢測的物料試劑成本，也大大節(jié)省了檢測時間，進一步提高了檢測的速度和適用性。

 

　　探針法qPCR試劑盒的實驗注意事項：

　　1）PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；

 

　　2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

 

　　3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

 

　　4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。