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上海一研生物科技有限公司

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間接ELISA的操作程序

閱讀:1298      發(fā)布時(shí)間:2016-10-12
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本法主要用于檢測(cè)抗體。以鴨病毒性肝炎(DVH)抗體的ELISA為例,間接ELISA的操作程序如下:
(1) 材料
① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液;
② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗抗體、陰性及陽(yáng)性DVH參考血清;待檢鴨血清;
③ ELISA檢測(cè)儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。
(2) 方法步驟
① 加抗原包被 → 4℃隔夜,洗滌三次、拋干
② 加待檢血清 → 37℃ 2小時(shí),洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 2小時(shí),洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值,并計(jì)算出P/N比值。
(3) 結(jié)果判定 已知陽(yáng)性血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1,而且已知陽(yáng)性血清的OD值≥0.4;在上述條件成立的情況下,如果待檢血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1,而且待檢血清的OD值≥0.4,則判為陽(yáng)性,否則判為陰性。

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