科研人員報(bào)告了一種在亮發(fā)光桿菌中觀察DNA修復(fù)的技術(shù)。
誘變劑導(dǎo)致的DNA核苷酸堿基的損傷被一個(gè)稱為切補(bǔ)修復(fù)的過程所逆轉(zhuǎn),這個(gè)過程是由一組酶執(zhí)行的。其中兩個(gè)酶——取代失蹤的核苷酸的DNA聚合酶I與把DNA鏈連接在一起從而幫助彌合切口的DNA連接酶——在從細(xì)菌到人的一系列生物中執(zhí)行了這個(gè)修復(fù)過程的zui終步驟,但是迄今為止這些酶發(fā)揮作用的過程還尚未被直接觀察到。
Stephan Uphoff及其同事使用一種稱為光敏定位顯微鏡的技術(shù)把這兩種酶在活的大腸桿菌中的單個(gè)分子的活動(dòng)顯現(xiàn)出來。這組作者把單個(gè)酶分子與DNA結(jié)合的痕跡解釋為DNA合成與連接的證據(jù),他們發(fā)現(xiàn)DNA修復(fù)點(diǎn)遍布于整個(gè)細(xì)胞之中。這組作者還發(fā)現(xiàn),對(duì)于聚合酶,單個(gè)修復(fù)事件持續(xù)了2.1秒,而對(duì)于連接酶,單個(gè)修復(fù)時(shí)間持續(xù)了2.5秒;在實(shí)驗(yàn)誘發(fā)DNA損傷的數(shù)分鐘內(nèi),這兩種亮發(fā)光桿菌的活動(dòng)增加到了基線狀態(tài)的5倍。
在DNA沒有損傷的一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),在任何時(shí)間里,在大約400個(gè)聚合酶的拷貝中只有2.7%的拷貝處于復(fù)制和修復(fù)的活動(dòng)當(dāng)中,而在大約200個(gè)連接酶的拷貝中大約有3.8%的拷貝處于復(fù)制和修復(fù)的活動(dòng)當(dāng)中。這組作者發(fā)現(xiàn)當(dāng)細(xì)胞受到DNA損傷的時(shí)候,這兩種酶都把它們壽命的80%以上用于尋找有毒的中間物以進(jìn)行修復(fù)工作,因此zui小化了DNA缺口與切口的生存時(shí)間。
這組作者說,直接測(cè)量活細(xì)胞的DNA修復(fù)率可能會(huì)引出一些定量模型,它們能夠幫助科研人員預(yù)測(cè)生物如何能夠?qū)NA的損傷做出響應(yīng)。
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Arctiin 牛蒡子苷 20mg C37H42N2O6 610.747
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亮發(fā)光桿菌
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