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全羊血冷凍菌種保存法

閱讀:472      發(fā)布時(shí)間:2017-05-09
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1、脫纖維羊血
無(wú)菌抽取羊頸靜脈血后,沿瓶壁注入無(wú)菌的帶玻璃的三角燒瓶中,同時(shí)立即同一方向振搖約8-10分鐘,脫去纖維,然后分裝加蓋無(wú)菌小試管中約1.0-1.5ml。
將腦膜炎雙球菌、淋球菌、甲乙型鏈球菌、肺炎雙球菌分別接種于血平板培養(yǎng)基中,前兩者置于5-10%CO2燭缸內(nèi),經(jīng)35℃16-18小時(shí)培養(yǎng),后三者置37℃恒溫箱培養(yǎng)24小時(shí),然后無(wú)菌操作取一接種環(huán)菌苔移種于上述新鮮脫纖維羊血試管中,立即置-3O℃冰凍保存二年轉(zhuǎn)種一次。用時(shí)室溫自然冰融即可接種。
2、紙片法
新華定性濾紙剪成4mm×4mm,1.5ml帶蓋離心管消毒滅菌備用,用消毒小鉗子鉗上濾紙片于平板上刮取待保種的純菌落2-3個(gè)。放于離心管內(nèi)塞蓋再用封口膠布將蓋邊緣封好放于-30℃冰箱保存。保存12個(gè)月后取出菌種解凍后用無(wú)菌鉗取一片放于肉湯管內(nèi)37℃培養(yǎng)12小時(shí)后轉(zhuǎn)種血平板,性狀未變異。
3、奶粉液菌種保存法
菌種保存液:脫脂奶粉10g,NaCL10.5g,加雙蒸水100ml,121℃5分鐘高壓滅菌后分裝于1ml帶蓋無(wú)菌標(biāo)本杯中(0.5ml)備用。
無(wú)菌操作用4mm×10mm無(wú)菌濾紙條蘸取新鮮菌少許,放存含奶粉液保存杯中,蓋好,封口膠封口,低溫保存。3年存活率達(dá)99.2%。
使用時(shí)將標(biāo)本杯取出,不等全部融化,上層有少許融化即用接種環(huán)取一少許接種于血平板分離即可。
印第安那亞種 Bacillus thuringiensis subsp. indiana
印第安那亞種 Bacillus thuringiensis subsp. indiana
蘇云金芽胞桿菌以色列亞種 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis
蘇云金芽胞桿菌以色列亞種 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis
蘇云金芽胞桿菌日本亞種 Bacillus thuringiensis subsp. japanensis
大腸桿菌 Escherichia coli
球孢鏈霉菌 Streptomyces globisporus
蘇云金芽胞桿菌熊本亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kumamotoensis
蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki
蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki
蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki
蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki
蘇云金芽胞桿菌九州亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kyushuensis
蘇云金芽胞桿菌莫里遜亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Morrisoni
三七根腐病菌 Cylindrocarpon sp.

 

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