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三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒說明
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：96T
1.2ng/ml - 45ng/ml
三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒說明使用目的：
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中三磷酸肌醇(IP3)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠三磷酸肌醇(IP3)水平。用純化的小鼠三磷
酸肌醇(IP3)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入三磷酸肌醇
(IP3)，再與HRP 標記的三磷酸肌醇(IP3)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過
*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化
成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的三磷酸肌醇(IP3)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長
下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中小鼠三磷酸肌醇(IP3)濃度。
三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒說明試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶
2 酶標試劑6ml×1 瓶8 標準品（80ng/ml）0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板12 孔×8 條9 標準品稀釋液1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份
5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張
6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個
三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒說明操作程序總結(jié)：
計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個月

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