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更靈活更靈敏:瑞孚迪均相檢測(cè)技術(shù)賦能納米抗體的高效篩選

2025-7-25  閱讀(31)

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納米抗體生物醫(yī)藥新浪潮

近年來(lái),納米抗體(又稱(chēng)VHH)憑借其的結(jié)構(gòu)優(yōu)勢(shì)和生物學(xué)特性,正在全球范圍內(nèi)掀起生物醫(yī)藥研發(fā)的新浪潮。2018年,個(gè)納米抗體藥物Cablivi(caplacizumab)獲批上市,用于治療獲得性血栓性血小板減少性紫癜。目前,阿斯利康、爍星生物、復(fù)宏漢霖、康寧杰瑞等企業(yè)也在積極布局納米抗體藥物研發(fā),涵蓋CAR-T、雙抗、ADC等多個(gè)治療領(lǐng)域。

納米抗體的作用原理與優(yōu)勢(shì)

納米抗體(Variable Heavy-chain-only Antibody,單域重鏈抗體),又稱(chēng)VHH,是一種僅由重鏈可變區(qū)(VH)構(gòu)成的特殊抗體。與傳統(tǒng)IgG抗體(含重鏈和輕鏈)不同,納米抗體不含輕鏈,但仍能高效結(jié)合抗原,并具有分子量小、穩(wěn)定性高、組織穿透性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)。

(1)納米抗體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

  • 單域結(jié)構(gòu):僅含15 kDa的單一可變區(qū),缺乏Fc段

  • 保守性FR2區(qū):含V37F/Y、G44E等特征氨基酸,顯著增強(qiáng)耐酸堿性

  • 凸型CDR3:可深入抗原裂隙(如酶活性中心、GPCR結(jié)合位點(diǎn))

(2)納米抗體的功能優(yōu)勢(shì)

  • 小分子量:可穿透血腦屏障,適用于神經(jīng)系統(tǒng)疾?。ㄈ绨柎暮D。?/p>

  • 穩(wěn)定性:可開(kāi)發(fā)口服、吸入等非注射劑型

  • 靈活的多價(jià)構(gòu)建:可用于設(shè)計(jì)雙抗、三抗或ADC藥物

  • 較低的免疫原性:人源化改造簡(jiǎn)單,臨床轉(zhuǎn)化優(yōu)勢(shì)明顯

瑞孚迪解決方案:精準(zhǔn)/高效納米抗體檢測(cè)

傳統(tǒng)納米抗體篩選方法(如ELISA、噬菌體展示)存在通量低、假陽(yáng)性率高、靈敏度不足、數(shù)據(jù)分析復(fù)雜等問(wèn)題。瑞孚迪的均相檢測(cè)技術(shù),為納米抗體研發(fā)提供高通量、高靈敏度、智能化的全流程解決方案:

  • 免洗滌均相檢測(cè):無(wú)需包被、洗滌等繁瑣步驟,"加樣-孵育-檢測(cè)"三步流程僅需2小時(shí),大幅縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,實(shí)現(xiàn)高通量篩選;

  • 超高靈敏度與低背景干擾:采用時(shí)間分辨熒光(TRF)技術(shù),延遲檢測(cè)可消除短壽命背景熒光,使信噪比提升10倍以上,AlphaLISA采用信號(hào)放大微珠,靈敏度達(dá)fg/mL級(jí),尤其適合低豐度納米抗體的檢測(cè);

  • 兼容復(fù)雜樣本基質(zhì):對(duì)樣本基質(zhì)耐受性強(qiáng),可在血清血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清中直接檢測(cè),避免純化步驟的損耗。

瑞孚迪提供兩種可靈活選擇的納米抗體檢測(cè)模型:

直接識(shí)別納米抗體

在檢測(cè)體系中,供體(donor)標(biāo)記的抗體能夠特異性識(shí)別并結(jié)合蛋白標(biāo)簽,而受體(acceptor)則標(biāo)記有高親和力的抗納米抗體單克隆抗體,可特異性結(jié)合納米抗體的框架區(qū)(FR)。當(dāng)靶蛋白與納米抗體成功結(jié)合時(shí),供體和受體在空間上相互靠近,從而產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào),通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)量該信號(hào)的強(qiáng)度。



噬菌體展示納米抗體庫(kù)篩選

AlphaLISA受體珠與M13噬菌體主衣殼蛋白結(jié)合,實(shí)現(xiàn)免洗檢測(cè),適用于肽,納米抗體或scFv的選擇和滴定。




結(jié)語(yǔ)

隨著基因編輯、AI建模等技術(shù)的進(jìn)步,納米抗體在腫瘤免疫、神經(jīng)退行性疾病、感染性疾病等領(lǐng)域的應(yīng)用潛力持續(xù)擴(kuò)大。瑞孚迪檢測(cè)技術(shù)將持續(xù)升級(jí),無(wú)論是基礎(chǔ)研究還是產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā),瑞孚迪的高效、精準(zhǔn)和自動(dòng)化優(yōu)勢(shì)都能幫助科學(xué)家更快、更好地實(shí)現(xiàn)突破。

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