| 純度 |
99.9 |
供貨周期 |
一周 |
| 規(guī)格 |
1*10^6cells/T25方瓶 |
貨號 |
XY-H315 |
| 應用領(lǐng)域 |
醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 |
主要用途 |
僅用于科研 |
MCF-10A(人乳腺細胞) 是生物學和醫(yī)學研究中常用的工具，指從生物體組織或器官中分離出的細胞，在體外培養(yǎng)條件下能夠存活、增殖并保持特定功能的細胞群體。
MCF-10A(人乳腺細胞)
Human Normal Mammary Epithelial Cells
規(guī)格：T25或1mL凍存管 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長
傳代：1:2至1:3，每周3次
培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
| 一、細胞基本屬性 |
| 細胞名稱 | 人乳腺上皮細胞MCF 10A |
| 細胞別稱 | MCF 10A，人乳腺上皮細胞 |
| 種屬來源 | 人 |
| 組織來源 | 乳腺 |
| 生長特性 | 貼壁生長 |
| 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
| 細胞規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
| 支原體檢測 | 無 |
| 培養(yǎng)基 | 準備MEGM kit培養(yǎng)基 備注：培養(yǎng)基包含（A+B）
A: MEBM基礎(chǔ)培養(yǎng)液
B: 細胞生長添加劑 5管
霍亂毒素（cholera toxin） (100ng/ml) 500 ul
P/S青霉素-鏈霉素 5 ml |
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
| 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
| 細胞貨期 | 1-2周 |
| 運輸方式 | 復蘇發(fā)貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 |
| 供應限制 | 僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 |
| 二、細胞培養(yǎng)操作 |
| 收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 |
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| 收貨處理 | 觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài) | 收到細胞后，需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復蘇 |
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| 傳代密度 | 細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細胞密度 |
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| 傳代比例 | 傳代建議1：2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | 一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 |
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| 傳代方法 | 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 1） 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 |
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| 注意事項 | 1.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 2.因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。 | 1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存；
2.為保證細胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復蘇細胞。 |
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| 到貨須知 | 1.收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 3.由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。 |
| 三.細胞凍存操作 |
| 凍存液配方 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
| 細胞密度 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例 |
| 凍存方法 | 1，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml培養(yǎng)基重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為7.5%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 注意事項 | 凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案 |
| 四、售后服務 |
| 重發(fā)標準 | 1.細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)； 2.收到細胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)； 3.收到細胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)； 4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后，絕大多數(shù)細胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)； 5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)； 6.細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)； 7.視具體情況而定。 |
| 不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)； 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)； 3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)； 4.細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)； 5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)； 6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)； 7.視具體情況而定。 |
僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途，不為任何個人提供產(chǎn)品和服務。以實際收貨產(chǎn)品說明書為準，網(wǎng)站說明書僅供參考。
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