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上海源葉生物科技有限公司
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豬丹毒分子生物學(xué)診斷技術(shù)
2011-5-18 閱讀(494)
日本Okayama大學(xué)的研究者們建立了檢測(cè)豬丹毒的PCR方法（1999）。
常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)豬丹毒至少要3天，鑒定血清型大約要lo天，而這種PCR法可在5h內(nèi)完成。它使用兩步擴(kuò)增法，先用高度特異性引物組M0101-M0102進(jìn)行初步擴(kuò)增之后，再添加4種特異性寡核苷酸引物組對(duì)4種不同血清型豬丹毒的16SrRNA序列進(jìn)行擴(kuò)增。
rRNA基因簇包括16SrRNA、23SrRNA、5SrRNA、下游非編碼區(qū)。對(duì)該簇編碼的DNA序列進(jìn)行測(cè)定，以設(shè)計(jì)種特異性PCR檢測(cè)系統(tǒng)的引物。豬紅斑丹毒絲菌2型、3型、18型及扁桃體丹毒絲菌血清?型的rRNA基因的DNA序列的同源性在96．0％一98．4％。
以前DNA探針雜交法和常規(guī)PCR都不能區(qū)分豬丹毒屬這4種血清型，而這種PCR擴(kuò)增法是特異的，能逐一區(qū)別鑒定，而且它可以從患病動(dòng)物的組織樣品中直接進(jìn)行PCR試驗(yàn)并得出結(jié)果。整個(gè)試驗(yàn)不超過5h，這種對(duì)編碼rRNA基因簇的DNA序列的特異性系統(tǒng)PCR擴(kuò)增法十分，易讀顯示結(jié)果，可快速診斷屠宰場(chǎng)豬丹毒菌感染豬。
