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液相常用檢測(cè)器

閱讀:3997      發(fā)布時(shí)間:2017-5-31
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液相常用檢測(cè)器

HPLC中常用的檢測(cè)器分有如下幾種,紫外吸收檢測(cè)器(UVD)、二極管陣列檢測(cè)器(PDAD)、熒光檢測(cè)器(FLD)、示差折光檢測(cè)器(RID)、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)、質(zhì)譜檢測(cè)器(MSD)等。

 

選擇性檢測(cè)器

1、紫外吸收檢測(cè)器(UVD是目前HPLC中應(yīng)用zui廣泛的檢測(cè)器。它的主要特點(diǎn)是靈敏度高,線性范圍寬,對(duì)流速和溫度變化不敏感,可用于梯度洗脫。它要求被檢測(cè)樣品組分有紫外吸收,屬于選擇性檢測(cè)器。

2、二極管陣列檢測(cè)器(PDAD20世紀(jì)80年代才出現(xiàn)的一種光學(xué)多通道檢測(cè)器,它可以看作是UVD的一個(gè)分支。在對(duì)每個(gè)洗脫組分進(jìn)行光譜掃描,經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后,得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜。其中吸收光譜用于定性(確證是否是單一純物質(zhì)),色譜用于定量,常用于復(fù)雜樣品(如生物樣品、中草藥)的定性定量分析。

3熒光檢測(cè)器(FLD同樣屬于選擇性檢測(cè)器,其靈敏度在目前常用的HPLC檢測(cè)器中是zui高的,應(yīng)用也較多,僅次于UVD。它適用于能激發(fā)熒光的化合物。很多與生命科學(xué)有關(guān)的物質(zhì),如氨基酸、胺類、維生素、甾族化合物及某些代謝藥物都可以用熒光法檢測(cè)。熒光檢測(cè)器在生物樣品痕量分析中很有用,尤其在用熒光衍生后,可以檢測(cè)很微量的氨基酸和肽。
通用型檢測(cè)器

1、示差折光檢測(cè)器(RID是一種通用型檢測(cè)器,只要被測(cè)組分與洗脫液的折光指數(shù)有差別就可使用。生命科學(xué)中常遇到各類糖類化合物,沒有紫外吸收,一般常用示差折光檢測(cè)器。它的通用性比UVD廣,但靈敏度要低,對(duì)溫度變化敏感,并與梯度洗脫不相容,因而限制了它的使用。

2蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD也是一種通用型的檢測(cè)器,可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品,而不需要樣品含有發(fā)色基團(tuán)。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比,因而能用于測(cè)定樣品的純度或者檢測(cè)未知物。ELSD靈敏度比RID高,對(duì)溫度變化不敏感,基線穩(wěn)定,可用于梯度洗脫。現(xiàn)在ELSD已被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測(cè)。

 

3、質(zhì)譜檢測(cè)器(MSD是另一種通用型檢測(cè)器,在靈敏度、選擇性、通用性及化合物的分子量和結(jié)構(gòu)信息的提供等方面都有突出的優(yōu)點(diǎn)。但它的昂貴操作費(fèi)用和復(fù)雜性限制了它的推廣應(yīng)用。

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