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酸性蛋白酶測定試劑盒的操作方法

閱讀:884      發(fā)布時間:2023-8-30
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酸性蛋白酶(ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。酸性蛋白酶能夠在酸性條件下,催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸,酪氨酸在堿性條件下能夠還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán),產(chǎn)物在680nm處具有特征吸收峰,通過吸光值變化即可表征酸性蛋白酶的活性。

酸性蛋白酶測定試劑盒的使用步驟:

1、用Hanks液配制0.1%臺盼藍(lán)溶液;

2、用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液來消化培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞;

3、再加入適量Hanks液制成細(xì)胞懸液;

4、將待染色細(xì)胞稀釋至所需濃度;

5、每0.1ml細(xì)胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴,室溫下染3—5min;

6、染色過的細(xì)胞材料,取一滴細(xì)胞懸液置玻片上,加蓋玻片后放高倍鏡下觀察;

7、死亡的細(xì)胞著淺藍(lán)色并膨大,無光澤?;罴?xì)胞不著色并保持正常形態(tài),有光澤;

8、計數(shù)1000個細(xì)胞中的活細(xì)胞和死細(xì)胞數(shù)目;

9、統(tǒng)計未染色細(xì)胞??砂垂接嬎愠黾?xì)胞活率。

酸性蛋白酶測定試劑盒的注意事項

1、如儀器無本試劑盒要求的波長,請選擇接近的波長。

2、不同批次的試劑不推薦混合使用。

3、使用時請做好防護措施并嚴(yán)格執(zhí)行實驗操作規(guī)程。且廢液按環(huán)保要求處理。

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