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漆酶活性是如何檢測的?

閱讀:3761      發(fā)布時間:2021-3-12
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  漆酶是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。酶液的提取步驟:

  1、細胞:按照細胞數量(10*個) :提取液體積(ml) 為500-1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率30% 或300W,超聲3s,間隔7s,總時間3min),12000g 4C離心10min,取上清,置冰上待測。

  2、組織:按照組織質量(g) :提取液體積(ml) 為1:5-10 的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿; 1000g 4C離心10min,取上清,置冰上待測。

  3、 培養(yǎng)液:直接待檢。

  漆酶活性檢測試劑盒測定漆酶活性是利用漆酶分解底物ABTS產生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數遠大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。

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