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大鼠腦立體定位儀實(shí)驗(yàn)操作指導(dǎo)
先了解下某些顱外標(biāo)記與顱內(nèi)結(jié)構(gòu)具有相對固定的位置關(guān)系。
1.前囟(bregma):位于冠狀縫和矢狀縫的交接處
2.人字縫尖(ambda):位于后囟人字縫與矢狀縫交會點(diǎn)
儀器使用所需材料：
大鼠，立體定位儀，哺乳類手術(shù)器械,牙科鉆，20%氨基甲酸乙酯，生理鹽水，2%滂胺天藍(lán)溶液
測試方法：
測試方法：
麻醉：20%氨基甲酸乙酯0.6 ml/100g, i.p.
固定：將大鼠頭部固定于腦立體定位儀.上，門齒桿-3.3mm ；3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)檢測是否固定成功(鼻對正中，頭部不動，提尾不掉)；切頭皮,剝開皮下組織，將骨縫暴露清晰，用鉛筆在前囟和后囟各做一-標(biāo)志.；核團(tuán)定位，做標(biāo)志，鉆孔；LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm
小心安 放微量注射器，針尖斜面中點(diǎn)進(jìn)入孔內(nèi)時(shí)，記高度。緩慢進(jìn)針至LV ,注入10 μl 2%滂胺天藍(lán)溶液(2 μl/min),留針10 min后緩慢拔針
確定注射位置：
取下動物,腹腔注射過量的20%氨基甲酸乙酯使動物死亡。
以咬骨鉗咬開顱骨，小心取出大腦，順著注射點(diǎn)將大腦切開，觀察染料是否在側(cè)腦室內(nèi)
■立體定位儀為精密儀器,實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)小心操.作,以免損壞
■微量注射器取出后應(yīng)立即清洗,以防堵塞