GB/T 30690—2014《小型壓力蒸汽滅菌器滅菌效果監(jiān)測方法和評價要求》提出：每年應(yīng)對小型壓力蒸汽滅菌器的滅菌參數(shù)、滅菌效果和排氣口生物安全性進(jìn)行驗證。

1、驗證方法

將溫度測定儀放入滅菌器，每層設(shè)定3個點(diǎn)，各層間按對角線布點(diǎn)；將一個壓力測定儀放入滅菌器底部中心；再放入模擬的常規(guī)處理物品至滿載。經(jīng)一個滅菌周期后，取出溫度測定儀和壓力測定儀，讀取溫度、壓力和時間等參數(shù)的實(shí)測值。所用溫度、壓力測定儀參見附錄A。

2、評價指標(biāo)

具體要求如下:

a) 整個滅菌循環(huán)中，滅菌溫度范圍的實(shí)測值不低于設(shè)定值，且不高于設(shè)定值3℃，滅菌室內(nèi)任意2點(diǎn)差值不得超過2℃;

b) 實(shí)測壓力范圍應(yīng)與實(shí)測溫度范圍相對應(yīng);

c) 滅菌時間實(shí)測值不低于設(shè)定值，且不超過設(shè)定值的10%。

符合a)~c)3項要求，則為合格；3項中任意1項不符合要求，則為不合格。

1、生物測試包的制備

生物驗證用指示菌為嗜熱脂肪桿菌(Geobacillus stearothermophilus ATCC 7953 或 SSIK31)芽孢。生物測試物包根據(jù)不同滅菌負(fù)載分別制備,制備方法如下:

a) 滅菌無包裝裸露物品時，將生物指示物裝入壓力蒸汽滅菌專用紙塑包裝袋中,即為生物測試包；

b) 滅菌有包裝物品時，選取該滅菌程序下，常規(guī)處理物品包中最難滅菌的物品包，將生物指示物放入包中心,即為生物測試包。

c)滅菌管腔型物品時選擇相應(yīng)管腔型PCD 將其制備成生物PCD，即為生物測試包。

d)滅菌特殊物品時，按照不同負(fù)載類型選擇相對應(yīng)的負(fù)載制備生物測試包。

2、 生物驗證方法

滅菌器每層中間、排氣口和近滅菌器門處各放置一個生物測試包，在滅菌器內(nèi)放入模擬的常規(guī)處理物品至滿載，經(jīng)過一個滅菌周期后，取出生物測試包中的生物指示物，經(jīng)56℃±2℃培養(yǎng)7d，觀察培養(yǎng)基顏色變化，同時設(shè)陽性對照和陰性對照；自含式生物指示物按說明書執(zhí)行，并設(shè)陽性對照。

3、生物評價指標(biāo)

①自含式生物指示物

自含式生物指示物按產(chǎn)品說明書的要求進(jìn)行評價，按要求培養(yǎng)至規(guī)定時間后，實(shí)驗組、陽性對照組和陰性對照組顏色變化均符合產(chǎn)品說明書規(guī)定，則本次滅菌合格；反之則不合格。

菌片培養(yǎng)7d后，陽性過照組由紫色變成黃色，實(shí)驗組和陰性對照組不變色，則本次滅菌合格；反之，則不合格。

在以下情況下，需檢查小型壓力蒸汽滅菌器排氣口處是否有防止病原微生物排入環(huán)境的措施，并對其效果進(jìn)行驗證，確保排出的空氣中沒有相應(yīng)的病原微生物(具體驗證方法參見附錄B):

a)用于生物安全Ⅲ級實(shí)驗室(BSL-3);

b)用于生物安全Ⅳ級實(shí)驗室(BSL-4);

c)滅菌的物品可能帶有經(jīng)呼吸道傳播的病原微生物