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PI細胞周期可能有四種命運

閱讀:1190        發(fā)布時間:2022-10-22
  PI細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。細胞周期是一個重要的檢測參數(shù),研究細胞周期變化的影響對于腫瘤的發(fā)展及藥物研發(fā)有著重要的作用。例如,已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。
 
  PI細胞周期檢測步驟:
 
  1.細胞樣品的準備:
 
  收集細胞,用1ml預冷PBS洗1遍,輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞,避免細胞成團。
 
  2.細胞固定:
 
  加入1ml預冷的70%乙醇中,輕輕吹打混勻,4度固定2小時或更長時間(固定12-24小時可能效果更佳)。1000g離心3-5分鐘,沉淀細胞(如果細胞沉淀不充分,可以適當延長離心時間或加大離心力)。棄上清,用用1ml預冷PBS洗1遍。
 
  3.PI染色:
 
  每個樣品用0.5ml染色緩沖液(或PBS)重懸,加入25ulPI染色液(20×)、10ulRNaseA(50×)。37度避光溫浴30分鐘。
 
  4.流式檢測:
 
  用流式細胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光,同時檢測光散射情況。采用分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析。
 
  PI細胞周期可能有四種命運:
 
 ?、偌毎汳期又開始第二次周期;
 
 ?、谕V褂贕2期,稱為G2期細胞(R2),它受某種刺激后可進入周期;
 
 ?、弁V乖贕1期,稱為休止細胞或G0期細胞,這類細胞受某種刺激后仍能進入周期,繼續(xù)進行有絲分裂;
 
 ?、軉适谒劳龅募毎Q為丟失細胞,或稱不再分裂的細胞。繼續(xù)分裂的細胞沿著細胞周期從一個有絲分裂期到下一個分裂期。不再分裂的細胞離開了細胞周期不再分裂,終死亡。

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